Ц елый ряд патологических состояний приводит к той или иной форме повреждения клетки, которое практически всегда подразумевает нарушение целостности как плазматической мембраны, так и мембран клеточных органелл. Абсолютно логичным в такой ситуации представляется поиск лекарственных препаратов, восстанавливающих нарушенное равновесие. К таким лекарственным препаратам, несомненно, относятся эссенциальныефосфолипиды, традиционно использующиеся в терапии заболеваний печени [1]. Строение клеточной мембраны Все клетки человеческого организма построены однотипно, в частности, у них имеется много раз личных мембран: окружающая клетку плазматиче ская мембрана (плазмолемма), внутренняя и на ружная мембраны ядерной оболочки, внутренняя и наружная мембраны митохондрий, мембраны эндо плазматической сети, лизосом, пероксисом и дру гих клеточных структур. В основе всех мембран лежит двойной слой липидов. Каждая молекула мембранного липида имеет гидрофильную головку и два гидрофобных хвоста. Кроме того, в состав мембраны входят интегральные (насквозь прони зывают липидный бислой) и периферические (свя заны только с одной из поверхностей мембраны) белки, а также углеводы в виде гликолипидов и гликопротеинов (рис. 1). Биологические мемб р а ны обладают следующими общими свойствами: – з амкнутос т ь (липидные бислои всегда са мостоятельно замыкаются на себя с образованием полностью отграниченных отсеков, в этом случае все гидрофобные участки мембраны изолированы от окружающей среды; по той же причине мембра не присуще такое свойство, как самосшивание); – тек учес т ь(подвижность); компоненты мем браны могут перемещаться в пределах своего слоя; – наружная и внутренняя поверхности мембра ны отличаются по своему составу, что определяет полярность или асимметричность мембра н ы . В состав мембраны входят липиды различных классов: фосфолипиды, сфинголипиды, гликоли пиды и стероиды (холестерин). Первые три класса липидов имеют характерное строение (гидрофиль ная головка и два гидрофобных хвоста), которое показано на рисунке 1. В наибольшем количестве в мембранах присутствуют фосфолипиды,которые служат ее структурными компонентами и никогда не запасаются в организме в большом количестве. У фосфолипидов в состав головки входят последо вательно связанные между собой остатки азоти стого основания (холина, коламина или серина), фосфатной группы и глицерина. Остатки жирных кислот, образующие гидрофобные хвосты, соеди нены с глицерином. В качестве насыщенной кисло ты обычно выступает пальмитиновая, а в качестве ненасыщенной – олеиновая, линолевая, линолено вая и т.д. То же соединение, но без азотистого ос нования называется фосфатидной кислотой, в сво бодном виде она встречается в очень небольшом количестве, играя роль промежуточного продукта в синтезе фосфолипидов. Следовательно, фосфоли пиды можно рассматривать, как производные фос фатидной кислоты. Отсюда происходит название ряда важнейших фосфолипидов, в частности, их основного представителя – фосфатидилхолина. Холестерин отличается по своему строению от первых трех классов липидов. Он представляетсобой вытянутую систему четырех углеводородн ы хциклов и углеводородную боковую цепь и является гидрофобным соединением, за исключениемодной гидроксильной группы, которая образуетполярную головку (рис. 2). Холестерин входит всостав наружной клеточной мембраны и образуетее жесткую структуру, ухудшая такое свойствомембраны, как текучесть.Каждый вид мембраны отличается строго определенным содержанием различных классов липидов, что во многом определяет ее свойства. Приувеличении содержания в мембране фосфолипидовповышается ее лабильность, что облегчает различные виды диффузии. Как правило, более лабильнывнутренние мембраны, т.е. они более текучи и более проницаемы [2,3].Таким образом, фосфолипиды обеспечивают основные свойства клеточных мембр а н ; они представляют собой эндогенные соединения, синтез которых нарушается при повреждении клетки. Справиться с этим противоречием можно путем введения этих веществ извне, в такомслучае они носят название эссенциальных фосфолипидов (ЭФЛ).ЭФЛ представляют собой фосфолипидные экстракты высокой очистки, полученные из соевыхбобов, содержащие ненасыщенные жирные кислоты. Различают две степени очистки ЭФЛ – с72–76% и 92–96% содержанием фосфатидилхолина. Основное терапевтическое значение имеетсоединение, которое называется 1,2 – дилинолеоилфосфатидилхолин (DLPC), представляющий неотъемлемую часть препарата и обладающий целымрядом полезных свойств.В человеческом организме фосфолипиды с полиненасыщенными жирными кислотами встречаются достаточно редко. При поступлении DLPC в организм он заменяет присущие организму фосфолипиды, что ведет к значительному повышению егосодержания в мембранах. Факт способности DLPCвстраиваться в клеточные мембраны подвергалсясомнению вплоть до 90–х годов, когда К. Етте ссотрудниками констатировали, что маркированныедейтерием линолевые кислоты присутствуют в1–позиции DLPC даже после абсорбции молекулы.Этот результат в дальнейшем был подтвержден раб о т а м иЧ. Либера и его коллег. Максимальный уровеньабсорбции ЭФЛ достигается через 6–8 часов; молекулы ЭФЛ транспортируются преимущественно впечень, где встраиваются в гепатоциты и синусоидальные клетки. Транспортировка осуществляетсяпосредством липопротеидов высокой плотности.Большое количество экспериментальных и клинических работ посвящено использованию ЭФЛ влечении алкогольной болезни печени.Необходимо отметить две характерные чертыалкогольного повреждения печени – стимуляцияфиброгенеза и повреждение клеточных мембран снарушением их фосфолипидного слоя. Кроме того,алкоголь приводит к нарушению обмена ряда жизненно важных соединений, например, метионина. Вобычных для человеческого организма условияхметионин представляет собой аминокислоту, присутствие которой должно быть обеспечено в пищевом рационе. Вместе с тем, чтобы использоватьметионин в обмене веществ, его необходимо активировать в S–аденозилметионин (SAMe). SAMe –основной метилируемый агент в различных реакциях трансметилирования, что очень важно длясинтеза нуклеиновых кислот и белков. Кроме того,реакции метилирования очень важны для поддержания текучести мембран и транспорта метаболитов. Уменьшение содержания SAMe при алкогольном повреждении печени связано с нарушением активности фермента метионинаденозилтрансферазы(SAMe–синтетазы), что происходит в результатедействия алкоголя (рис. 3). Решить создавшуюсяпроблему можно введением в организм уже готового SAMe. Эффективное использование SAMe дляреакций трансметилирования и транссульфурирования было показано in vivo. В работах Ч. Либераи сотр. (1990 г.) отмечено, что SAMe снижает степень повреждения митохондрий у обезьян, которымвводился этанол. Введение SAMe приводит к снижению смертности среди пациентов с циррозом печени классов А и В по шкале Чайлд–Пью [11]. Таким образом, скорее, SAMe, нежели метионин, является тем соединением, которое должно поступать в человеческий организм при серьезном заболевании печени.Однако в случае поражения печени также нарушена активность другого фермента – фосфатидилэтаноламинметилтрансферазы, который отвечаетза синтез эндогенного фосфотидилхолина из фосфатидилэтаноламина (рис. 3). И с этим ферментативным блоком можно справиться путем введенияуже готового продукта химической реакции, аименно – эссенциальных фосфолипидов.Обсуждаются различные механизмы повреждения этанолом фосфолипидного слоямембран. По одной из гипотез хроническое употребление алкоголя уменьшает активность фосфатидилэтаноламинметилтрансферазы, другой возможный механизм (исследован на изолированныхгепатоцитах крыс) связывают с образованием фосфатидилэтанола и нарушением сигнальной трансдукции, третий механизм обусловлен повышениемперекисного окисления липидов и увеличением содержания F 2 –изопростанов. Третья гипотеза позволяет объяснить и параллельное снижение содержания арахидоновой кислоты в фосфолипидах. Сцелью коррекции оксидативного стресса с успехоммогут использоваться эссенциальные фосфолипиды, что также показано на экспериментальной модели окислительного стресса, вызванного введением гетерологичного альбумина крысам [9].При длительном систематическом употребленииалкоголя образуются свободные радикалы, которые вызывают повреждение печени посредствомперекисного окисления липидов и поддерживаютвоспалительный процесс. Употребление этанолаповышает способность эндотоксинов проникать через кишечную стенку в кровоток. Попадая в печень, они активируют купферовские клетки, высвобождающие, в свою очередь, провоспалительные цитокины. В формировании конечной стадииАБП – цирроза печени – принимают участие стеллатные клетки. В нормальных условиях такиеклетки накапливают запасы витамина А. При стимуляции цитокинами или ацетальдегидом они претерпевают ряд функциональных и структурных изменений и начинают продуцировать фибрознуюткань, что приводит к формированию фиброза, азатем – и цирроза печени.Эссенциальные фосфолипиды благодаря своейбиодоступности и способности к селективной инкорпорации в печень могут действовать, как «водосточная труба» для свободных радикалов, ослабляя их вредные воздействия [9].Новейшие исследования ЭФЛ in vitro проводятся Ч. Либером и его сотрудниками (США). До90–х годов в работах использовались ЭФЛ92–96% содержания фосфатидилхолина, далее вовсе больших масштабах они стали проводиться сиспользованием DLPC в качестве основной активной субстанции.Ч. Либер и его сотрудники провели большое количество экспериментальных работ по изучениюантифибротического действия ЭФЛ. Всем хорошоизвестны его исследования на обезьянах. У бабуинов, которым с пищей вводился этанол, отмечалось повышение мРНК проколлагена I типа, увеличение количества стеллатных клеток с прогрессирующим печеночным фиброзом. Введение ЭФЛ нетолько восполняло у животных запасы эндогенныхфосфолипидов, но и полностьюпредотвращалоразвитие септального фиброза и цирроза печени;количество стеллатных клеток уменьшалось [9].Подобные результаты (уменьшение количествастеллатных клеток) наблюдались и у пациентов салкогольной болезнью печени [10].Один из основных механизмов алкогольной токсичности – образование свободных радикалов впроцессе окисления этанола цитохромом Р4502Е1(CYP2E1). Цитохром Р4502Е1 играет важную физиологическую роль в метаболизме кетонов, жирных кислот, детоксикации этанола и других ксенобиотиков. В то же время избыточная индукцияCYP2E1 начинает оказывать вредное воздействиевследствие высвобождения свободных радикалов.ЭФЛ действуют не только как антиоксиданты, нотакже служат одним из элементов, снижающих активность CYP2E1, что недавно было показано вработах М. Алейник и сотр. [4]. Кроме того,CYP2E1 обнаружен в купферовских клетках. Вэкспериментальной модели на крысах введениеэтанола приводило к семикратному повышению содержания CYP2E1, что вместе с эндотоксинамистимулировало купферовские клетки к выработкепровоспалительных и профиброгенных цитокинов.Результаты недавно проведенных исследованийсвидетельствуют о том, что введение ЭФЛ может уменьшать индукцию CYP2E1 [9] ииндуцированный алкоголем оксидативныйстресс, кроме того, ЭФЛ способны корректировать нарушенный в результате воздействия алкоголя липидный спектр.Л.М. Брэйди и соавт. [5] исследовали влияниеEPL на пролиферацию стеллатных клеток у крыс,индуцированную введением тромбоцитарного фактора роста. Стимулированная таким образом пролиферация стеллатных клеток в значительной степени блокировалась как под воздействием ЭФЛ,так и под воздействием чистой субстанции DLPC,в то время как вторая по частоте субстанция ЭФЛ– пальмитоиллинолеоилфосфатидилхолин такоговоздействия не оказывала. ЭФЛ и DLPC такжеблокировали каскад передачи сигналов протеинкиназы, активизированный тем же образом. Этотрезультат может рассматриваться, как антифибротический эффект ЭФЛ.Возможно использование ЭФЛ в леченииатеросклероза, что в 1999 г. было показано наживотной модели [12], а в 2000 г. те же авторыпоказали, что активность DLPC в 100 раз вышеa–токоферола. В работе В. Гуревича и соавт. [8] вдвойном слепом рандомизированном проспективном исследовании было показано, что комбинацияЭФЛ с ловастатином оказывает более выраженныйгиполипидемический эффект, чем монотерапия ловастатином. При этом уже на 8–й неделе удаетсядостичь желаемого уровня липопротеинов низкойплотности (130 мг/дл). Применение ЭФЛ в даннойситуации позволило удлинить период гиполипидемического действия ловастатина после его отменыи сделать схему лечения менее дорогой.Основные характеристики ЭФЛ (в частности, DLPC):• Представляют собой энергетически насыщенные структурные и функциональные элементы всехбиологических мембран.• Принимают участие в клеточной дифференцировке, пролиферации и регенерации.• Оказывают влияние на активность и активизацию связанных с мембранами белков, в том числе ферментов.• Содействуют регуляции транспорта молекулчерез мембраны, а также мембрано–зависимыхметаболических процессов между внутри– и межклеточным пространством.• Принимают участие в агрегации эритроцитов итромбоцитов.• Модулируют иммунологические реакции наклеточном уровне.К 2000 году было проведено 104 фармакологических исследования in vivo на 29 различныхмоделях у 7 различных видов животных, на основании чего выявлены новые свойства эссенциальных фосфолипидов.В работе M. Хвецко и соав. [7] определялисьуровни активности CuZn–супероксиддисмутазы(SOD), каталазы (САТ) и глютатионредуктазы впечени крыс. Нормализация активности SOD и САТпод воздействием ЭФЛ отражала антиоксидантныесвойства препарата.В работе В. Буко и сотр. [6] описано влияниеЭФЛ на микровязкость плазматической мембраныклеток крыс. С помощью специальной техники подтверждена способность DLPC встраиваться в мембрану, что приводит к замене насыщенных жирныхкислот ненасыщенными.Токсичности ЭФЛ не выявлено ни в одном изисследований даже при введении мышам, крысам икроликам избыточных доз; тератогенного действия, нарушений фертильности или мутагенности приприменении ЭФЛ также не наблюдается. Отсутствие токсичности ЭФЛ объясняется структурнымсходством с присущими организму фосфолипидами, никаких канцерогенных свойств у ЭФЛ такжене выявлено.Исследования токсичности в отношении изолированного активного вещества DLPC не проводились и не представляются необходимыми, поскольку DLPC рассматривается, как неотъемлемаясоставная часть ЭФЛ, а не как отдельная субстанция.В заключение следует отметить, что в результате проводившихся исследований с использованием ЭФЛ было установлено, что эти соединенияявляются эффективными и хорошо переносимымисредствами для профилактики и лечения различных заболеваний печени и нарушений обмена веществ.