Диклофенак (2(2,6 дихлоро–анилино)фенил]ацетиловая кислота, CAS 15307–86–5) – это нестероидный противовоспалительный препарат, используемый для купирования разного рода болей и лечения воспалительных процессов различной локализации (рис. 1) [1].
Существует множество фармацевтических (галеновых) форм препарата, он может применяться перорально, ректально, внутримышечно или местно. На рынке лекарственных средств диклофенак представлен в виде свободной кислоты, натриевой и калиевой соли, причем калиевая соль диклофенака гораздо лучше растворяется в воде [1,2].
Цель данного исследования заключалась в сравнительном анализе фармакокинетических показателей и изменений во времени сывороточной концентрации калиевой соли диклофенака, которую добровольцы получали перорально в дозе 50 мг в форме саше или таблеток, покрытых сахарной оболочкой. В соответствии с дизайном протокола (две формы препарата, перекрестное исследование с двумя периодами при однократном введении препарата) изучаемую группу составили 24 клинически здоровых мужчины и женщины.
Материалы и методы
Этические аспекты
Протокол исследования одобрен Этическим комитетом кантона Тичино (Швейцария). Отбор лиц для фазы I клинических испытаний проводился в соответствии со стандартными критериями включения/исключения. Перед началом испытаний Международный совет по лекарствам (IKS) распределил исследуемые лекарственные препараты под зашифрованными номерами. На всех этапах исследование проводилось в соответствии с принципами Хельсинкской декларации и поправками к ней, а также постановлениями правительства Швейцарии о проведении клинических испытаний [3].
Группы испытуемых
В исследование включены 24 клинически здоровых мужчины и женщины европейской расы в возрасте от 19 до 53 лет (демографические характеристики указаны в таблице 1). Состояние здоровья испытуемых оценивалось с помощью субъективных и объективных методов обследования, включая основные показатели состояния организма, анализы крови и мочи. По окончании испытаний те же самые обследования повторялись. Участники были подробно проинформированы об активности препарата и его возможных побочных эффектах; если испытуемые соглашались принять участие в исследовании, то они подписывали форму добровольного информированного согласия.
Лечение
Саше: 1 саше содержит 50 мг калиевой соли диклофенака калия для однократного приема, партия IT 6502 (Волтфаст®, производитель – Novartis Farma S.p.A., Италия).
Таблетки: 1 таблетка, покрытая сахарной оболочкой, содержит 50 мг калиевой соли диклофенака калия для однократного приема, партия 96F25AB (Катафлам®, производитель – Novartis Farma S.p.A., Италия).
В соответствии с дизайном испытаний (два периода перекрестного исследования, в котором изучались две последовательности введения препаратов) саше и таблетки принимались однократно, период вымывания составил одну неделю. Гепаринизированную кровь собирали следующим образом: перед приемом препарата (нулевое время), через 5, 10, 15, 30 и 45 минут, через 1; 1,5; 2, 3, 4, 6, 8, 10 и 12 часов после приема препарата. Кровь центрифугировали, полученную плазму хранили при –20°С до проведения анализа.
Анализ
Анализ проводился с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), в качестве детекторов использовались ультрафиолетовые лучи (275 нм), а в качестве внутреннего стандарта (ВС) – флуфенамовая кислота. Диклофенак и ВС экстрагировались из подкисленной плазмы с помощью смеси n–гексана и 2–пропанола в объемном соотношении 95:5. Органический компонент отделяли, концентрировали до сухости, восстанавливали до 200 мкл с помощью смеси ацетонитрила и воды в объемном соотношении 50:50 и собирали в автоматические пробоотборники. В качестве подвижной фазы использовали смесь ацетонитрила и 0,4% ортофосфорной кислоты в объемном соотношении 50:50 при скорости потока 1 мл/мин. на аналитической колонке Hypersil BDS–C8 (150?4,6 мм: ID 5 мкм). Наличие линейности устанавливали по калибровочной кривой в диапазоне 10–3000 нг/мл. Время удержания для диклофенака равнялось 7,2 мин., для ВС – 10,7 мин. (рис. 2). Межсерийная и внутрисерийная воспроизводимость составила ?7,98%, а точность – ?5,27%. Специфичность оказалась очень высокой. Возвращенная экстракция составила в среднем 91,8%.
Анализируемые вещества оставались стабильными при хранении как плазмы крови, так и в автоматических пробоотборниках при –4°С в течение 24 часов.
До начала испытаний и в процессе исследования расчеты производились в соответствии с общепризнанными международными критериями [4].
Фармакокинетический и статистический анализ
С помощью некомпартментого анализа по кривой зависимости концентрации препарата в плазме крови от времени оценивались следующие показатели:
AUC0–t – эмпирическая площадь под кривой от нулевого времени до момента времени «t» с поддающейся оценке концентрацией препарата (Спосл.), вычисленная по формуле трапеций;
AUC0–? – эмпирическая площадь под кривой, экстраполированная на ? = (AUC0–t + Спосл./?);
? – наклон последних концентраций препарата в плазме, преобразованных по логарифму, относительно времени;
Сmax – пиковая концентрация (максимальная концентрация препарата в плазме);
tmax – время, необходимое для достижения пиковых концентраций;
t1/2 – полупериод элиминации = 0,693/?.
Биодоступность оценивали по AUC0–t, AUC0–?, Сmax и tmax, эти показатели логарифмически преобразовывали и обрабатывали в рамках перекрестного анализа ANOVA при 90%–м доверительном интервале с двумя односторонними t–критериями [7–9]. Время, необходимое для достижения пиковых концентраций, вычисляли с использованием непараметрического критерия Вилкоксона, что позволяло выявить статически достоверную разницу.
Результаты
Переносимость
Доказано, что и саше, и таблетки переносились испытуемыми одинаково хорошо, о чем свидетельствовали субъективные и объективные наблюдения. Выраженные побочные эффекты отсутствовали, а в лабораторных анализах и по показателям жизненно важных функций не отмечалось существенных изменений. Единственным побочным эффектом оказалась незначительная головная боль, на которую пожаловался один из испытуемых после приема препарата в таблетированной форме, но по–видимому, это не было связано непосредственно с приемом препарата.
Концентрации диклофенака в плазме
На рисунке 3 изображены кривые средних концентраций диклофенака в плазме крови в зависимости от времени после приема препарата в двух разных формах. В обоих случаях концентрация диклофенака в плазме у всех испытуемых начинала нарастать достаточно быстро (уже через 5 минут после приема препарата), достигала максимального значения и затем монотонно убывала до необнаруживаемой в течение 4–12 часов. После приема саше концентрация диклофенака в плазме достигала пиковых значений уже через 10 минут у 7 из 24 испытуемых и через 15 минут – у оставшихся 17 лиц. Через 5 минут концентрация препарата в плазме составляла в среднем 831,5 нг/мл (или 38% от Сmax).
Фармакокинетические параметры
В таблице 2 представлены средние значения измеренных фармакокинетических параметров, их СО, CV%, минимальные и максимальные величины, геометрическое среднее и медианы. Эти данные свидетельствуют о том, что скорость всасывания диклофенака после приема саше гораздо выше, чем после приема таблеток, Сmax больше (2213 нг/мл и 1071 нг/мл, соответственно), а tmax короче (0,228 ч и 0,885 ч, соответственно).
Статистическая обработка результатов
При проведении анализа ANOVA, адаптированного для перекрестных испытаний, статистически достоверной разницы между периодами или последовательностями выявлено не было. В таблице 3 суммированы данные, позволяющие сравнить показатели для саше и таблеток при 90%–м доверительном интервале, а также результаты, полученные при проведении анализа с двумя односторонними t–критериями [9]. Значения AUC0–t и AUC0–? уместились в принятый для биоэквивалентности диапазон 0,80–1,25. Однако в случае Сmax этого не произошло из–за различной скорости всасывания препарата.
При использовании непараметрического критерия Вилкоксона была выявлена статистически достоверная разница (p<0,01) по времени, необходимом для достижения пиковых концентраций диклофенака в плазме, что лишний раз свидетельствует о более быстром всасывании препарата после его приема в форме саше.
Обсуждение и заключение
Согласно результатам предыдущих исследований концентрация диклофенака натрия достигала своего максимума после внутримышечного введения через 15 минут [10] и 25 минут [11]. По нашим данным, пик концентрации препарата после приема калиевой соли диклофенака в виде саше отмечался раньше (через 10 минут у 7 добровольцев и через 15 минут у оставшихся 17 испытуемых), а уже через 5 минут концентрация диклофенака составляла 38% от Сmax. Это связано с очень высокой растворимостью калиевой соли диклофенака, которая гораздо быстрее всасывается после приема порошка, чем таблетированной формы [12]. С точки зрения степени всасывания саше и таблетки оказались биоэквивалентны при 90%–м доверительном интервале в диапазоне 1,05–1,20 для AUC0–?.
Согласно недавно полученным данным [13] калиевая соль диклофенака в форме таблеток с немедленным высвобождением (50 мг и 100 мг) обладает очень хорошим обезболивающим действием при лечении мигрени, поскольку концентрация препарата в плазме крови достигала максимальной в среднем через 1 час после его приема (через 0,33–2 часа), а анальгезирующий эффект развивался через 60–90 мин. Сравнивая скорость всасывания, можно заключить, что диклофенак калия в форме саше будет оказывать обезболивающее действие гораздо быстрее.
В заключение следует отметить, что высокая растворимость калиевой соли диклофенака и очень хорошая всасываемость (особенно в форме саше) делают этот препарат превосходным анальгетиком, обезболивающий эффект при приеме которого наступает достаточно быстро.
Реферат подготовлен Е.Б. Третьяк
по материалам статьи:
“Pharmacokinetics of Diclofenac
after Oral Administration of its Potassium Salt
in Sachet and Tablets Formulations”
Arzneim.-Forsch./Drug Res. 2000,
50 (1), Nr. 1, p. 43-47
Литература
1. Martindale – The Extra Pharmacopoeia 31st Ed., pp. 36–37, The Royal Pharmaceutical Society, London (1996).
2. Todd, P. A., Sorkin, E. M., Diclofenac sodium: a re¬appraisal of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties and therapeutic efficacy. Drugs 35, 244 regulations for controlling clin¬ical trials. Pharmacol. Res. 37, 321 (1998).
4. Shah, V. P., Midha, K. K., Dighe, S. et al., Analytical methods validation: bioavailability, bioequivalence and pharmacokinetic studies. J. Pharm. Sci. 81, 309 (1992).
5. Marzo, A., Pharmacokinetic analysis, bioavailability and operating guidelines. J. Pharm. Pharmacol. 49, 1259(1997).
6. Marzo, A., Ceppi Monti, N., Acceptable and unac¬ceptable procedures in bioavailability and bioequiva¬lence trials. Pharmacol. Res. 38, 401 (1998).
7. Anonymous, CPMP. Note for guidance on the in¬vestigation of bioavailability and bioequivalence. CPMP / EWP / QWP / 1401 /98 draft. December 1998.
8. Anonymous. In vivo Bioequivalence Guidances / General Information. United States Pharmacopoeia 23 (Suppl. 8), 4382(1998).
9. Schuirmann, D. 1, A comparison of the two one¬sided tests procedure and the power approach for as¬sessing the equivalence of average bioavailability. J. Phar–macokinet. Biopharm. 15, 657 (1987).
10. Riess, W., Stierlin, H., Degen, P. et al., Pharmacoki–netics and metabolism of the anti–inflammatory agent voltaren. Scand. J. Rheumatol. Suppl. 22, 17 (1978).
11. Derendorf, H., Mullersman, G., Bart, J. et al., Pharmacokinetics of diclofenac sodium after intramus¬cular administration in combination with triamcinolone acetate. Eur. J. Clin. Pharmacol. 31, 263 (1986).
12. Davies, N. M., Anderson, К. Е., Clinical pharmaco–kinetic of diclofenac. Therapeutic insights and pitfalls Clin. Pharmacokinet. 33, 184 (1997).
13. McNeely, W., Goa, K. L., Diclofenac–potassium in migraine. A review. Drugs 57, 991 (1999).