Изучение гепатопротективной активности терпенсодержащего препарата на модели алкогольного повреждения печени

Импакт фактор - 0,651*

*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ

Ключевые слова
Похожие статьи в журнале РМЖ

Читайте в новом номере

Антиплагиат
Регулярные выпуски «РМЖ» №4 от 31.03.2021 стр. 4-9
Рубрика: Гастроэнтерология

Цель исследования: изучить возможность применения терпенсодержащего препарата в качестве гепатопротектора.

Материал и методы: опыт проведен на 48 самцах крыс Wistar средней массой 323,5±6,5 г в возрасте 2,5–3,0 мес., разделенных на 8 групп по 6 животных. Для исследования гепатопротективных свойств терпенсодержащей биологически активной добавки (БАД) КардиоОрганик® Омега-3 была взята модель этанол-индуцированной патологии печени при длительном введении 40% этанола в дозе 7 мл на 1 кг массы тела в течение 4 нед. Начиная с 3-й недели от начала введения этанола животным вводили тестируемые вещества (КардиоОрганик® Омега-3, льняное масло в различных концентрациях, препарат экстракта плодов расторопши пятнистой) перорально, продолжая вводить этанол. Затем по окончании введения этанола тестируемые вещества вводили еще 3 дня. По окончании введения всех веществ животных подвергали эвтаназии и осуществляли забор печени и крови для исследований. Проводили наблюдение за общим состоянием, оценивали динамику массы тела животных, биохимические показатели крови, определяли массовый коэффициент и патоморфологические изменения печени.

Результаты исследования: изучаемая терпенсодержащая БАД, как и препарат экстракта плодов расторопши пятнистой, способствовала: нормализации (повышению) уровня АлАТ и γ-глутамилтранспептидазы, резко сниженных в сравнении с нормой из-за нарушения функциональной активности гепатоцитов в результате воздействия алкоголя; сдвигу в сторону нормы (повышению) коэффициента де Ритиса; снижению уровня лактатдегидрогеназы и щелочной фосфатазы; нормализации соотношения прямого и непрямого билирубина (повышению прямого и снижению непрямого); нормализации (снижению) уровня общего белка и соотношения альбумина и глобулинов (повышению концентрации альбумина и снижению концентрации глобулинов). Кроме того, под воздействием исследованных веществ было показано улучшение структурно-морфологической организации печени. Наблюдали уменьшение признаков гидропической и зернистой дистрофии, некроза гепатоцитов, а также фибротических изменений.

Заключение: терпенсодержащий препарат КардиоОрганик® Омега-3 проявляет гепатопротективные свойства на модели алкогольного повреждения печени у крыс, что позволяет рассматривать терпенсодержащие соединения как перспективные гепатопротекторы.

Ключевые слова: терпеноиды, терпенсодержащие препараты, гепатопротектор, алкогольное поражение печени, эксперимент.


Для цитирования: Выштакалюк А.Б., Парфенов А.А., Маганова Ф.И., Лацерус Л.А. Изучение гепатопротективной активности терпенсодержащего препарата на модели алкогольного повреждения печени. РМЖ. 2021;4:4-9.

A.B. Vyshtakalyuk1, A.A. Parfenov1, F.I. Maganova2, L.A. Latserus2


1A.E. Arbuzov Institute of Organic and Physical Chemistry, Subdivision of Kazan Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, Kazan

2LLC "Initium-Pharm", Moscow


Aim: to study the possibility of using a terpene-based product as a hepatoprotector.

Patients and Methods: the experiment was conducted on 48 Wistar rats (male, average weight 323.5±6.5 g, age 2.5–3.0 months) divided into 8 groups of 6 animals. A model of ethanol-induced liver pathology was taken with long-term administration of 40% ethanol at a dose of 7 mL/kg for 4 weeks to study the hepatoprotective characteristics of the terpene-based dietary supplement, CardioOrganic® Omega-3. Starting from the 3rd week of the ethanol administration initiation, the animals were injected with the test substances (CardioOrganic® Omega-3, flaxseed oil in various concentrations, product based on milk thistle extract) per os, continuing to administer ethanol. Then, at the end of the ethanol administration, test substances were administered for another 3 days. At the end of administration of all substances, the animals were euthanized, and the liver and blood were taken for analysis. The general health condition was examined: dynamics of the animal body weight and biochemical parameters of the blood were evaluated, the mass coefficient and pathomorphological changes in the liver were determined.

Results: the terpene-containing product, CardioOrganic® Omega-3, as the product based on the milk thistle extract, contributed to: normalization (increase) of the ALT and GGT levels, sharply reduced versus the normal value as a result of alcohol exposure due to impaired functional activity of hepatocytes; a shift towards the norm (increase) of the De Ritis ratio; a decrease in the level of LDH and alkaline phosphatase; normalization of the ratio concerning direct and indirect bilirubin (increase in direct bilirubin and decrease in indirect bilirubin); normalization (lowering) of the total protein level and albumin and globulins ratio (increase in the albumin concentration and decrease in the globulins concentration). Besides, there was an improvement in the structural and morphological organization of the liver under the effect of the studied substances. There was a decrease in the signs of hydropic and granular dystrophy, hepatocyte necrosis, and fibrotic changes.

Conclusion: terpene-based product, CardioOrganic® Omega-3, exhibits hepatoprotective characteristics on the model of alcoholic liver disease in rats, which allows us to consider terpene-based compounds as promising hepatoprotectors.

Keywords: terpenoids, terpene-based drugs, hepatoprotector, alcohol-related liver disease, experiment.

For citation: Vyshtakalyuk A.B., Parfenov A.A., Maganova F.I., Latserus L.A. Study of the hepatoprotective activity concerning the terpene-based product on a model of alcohol-related liver disease. RMJ. 2021;4:4–9.

Введение

Проблема поиска новых гепатопротективных средств, повышающих резистентность печени к действию химических и токсических агентов и нормализующих ее детоксицирующую функцию и метаболизм, в настоящее время остается крайне актуальной [1–4]. Особое внимание заслуживают природные соединения класса терпенов, обладающие широким спектром фармацевтической активности и низкой токсичностью.

Биологически активная добавка (БАД) КардиоОрганик® Омега-3 содержит набор терпеноидов пихты сибирской (Abies sibirica L.), витамин Е и льняное масло, источник омега-3 жирных кислот. Исследования терпенов, входящих в состав данной БАД, показали, что они обладают антимикробным, противовоспалительным, ранозаживляющим, гиполипидемическим, антиатеросклеротическим и корригирующим действием при метаболическом синдроме [5–7]. С целью оценки влияния терпенов на гепатоциты были изучены противоопухолевые свойства терпенов, входящих в состав КардиоОрганика Омега-3, на клеточных линиях мышиной гепатомы Hepa1–6. Терпены вызывали апоптотическую гибель опухолевых клеток, ингибировали пролиферацию, нарушали митоз и обусловливали остановку клеточного цикла путем понижающей регуляции уровней экспрессии Cyclin D1, E1 и A2. Кроме того, была обнаружена антиангиогенная активность, которая может быть основным механизмом действия, направленного против гепатоцеллюлярной карциномы [8].

Цель исследования: оценить перспективы использования терпенов как потенциальных гепатопротекторов.

Материал и методы

Исследование проведено на 48 самцах крыс Wistar средней массой 323,5±6,5 г в возрасте 2,5–3,0 мес. Животных содержали в стандартных условиях в соответствии с правилами, утвержденными ГОСТ № 33215–2014 по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник [9].

Для исследования гепатопротективных свойств БАД КардиоОрганик® Омега-3 использовали модель этанол-индуцированной патологии печени при длительном введении 40% этанола в дозах от 5 мл до 10 мл на 1 кг массы тела, описанную в работах [10–12]. Доза алкоголя свыше 5 мл/кг (в пересчете на человеческий организм соответствует 600–750 мл выпитой водки) при введении животным является токсической, приводит к сильному алкогольному опьянению и интоксикации [10]. Алкоголизация животных при моделировании патологии печени происходит в 3 этапа, продолжительность первого этапа составляет 4 нед. [11].

Животные были разделены на 8 групп по 6 особей. Для моделирования этанол-индуцированной патологии печени животным вводили этанол в дозе 7 мл на 1 кг массы тела в течение 4 нед. Начиная с 3-й недели от начала введения этанола животным вводили тестируемые вещества перорально, продолжая вводить этанол. По окончании введения этанола тестируемые вещества вводили еще 3 дня. После этого всех животных подвергали эвтаназии и осуществляли забор печени и крови для исследований.

Схема введения веществ:

1-я группа: этанол + вода (контроль);

2-я группа: этанол + 12,5 мл/кг льняного масла — 1,25% раствор (контроль 1);

3-я группа: этанол + 25 мг/кг льняного масла — 2,5% раствор (контроль 2);

4-я группа: этанол + 50 мг/кг льняного масла — 5% раствор (контроль 3);

5-я группа: этанол + КардиоОрганик® Омега-3, доза 12,5 мг/кг, — 1,25% раствор;

6-я группа: этанол + КардиоОрганик® Омега-3, доза 25 мг/кг, — 2,5% раствор;

7-я группа: этанол + КардиоОрганик® Омега-3, доза 50 мг/кг, — 5% раствор;

8-я группа: этанол + препарат экстракта плодов расторопши (Карсил® ), доза 100 мг/кг.

Для правильного дозирования исследуемый препарат и льняное масло растворяли в дистиллированной воде с добавлением в качестве эмульгатора нейтрального вещества — полисорбата Twin-80, обладающего более высокой липофильностью по сравнению с полисорбатом Twin-20 и применяемого в пищевой промышленности. Препарат экстракта плодов расторопши растворяли в дистиллированной воде.

Осуществляли контроль общего состояния, оценивали динамику массы тела животных, биохимические показатели крови (АлАТ, АсАТ, АсАТ/АлАТ (коэффициент де Ритиса), билирубин общий, билирубин прямой, билирубин непрямой, общий белок, альбумин, глобулины, γ-глутамилтрансфераза (ГГТ), лактатдегидрогеназа (ЛДГ), щелочная фосфатаза, холестерин). Исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе АРД-200 с использованием специальных наборов реагентов.

Рассчитывали массовый коэффициент печени как отношение массы органа к массе тела животного.

Патоморфологические изменения печени оценивали на парафиновых срезах, окрашенных гематоксилином и эозином, и замороженных срезах, окрашенных суданом черным, а также по методу Ван-Гизона. Исследования проводили на прямом световом микроскопе Nikon H550S с цифровой камерой Nikon и программным обеспечением NIS Basic Research.

Статистическую значимость различий показателей определяли по методу Фишера — Стьюдента. Различия между группами считали статистически значимыми при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Результаты исследования представлены в таблицах 1–4.

Таблица 1. Показатели маркеров цитолиза сыворотки крови

Таблица 2. Показатели маркеров билирубинового обмена, холестаза и нарушения желчевыводящей функции

Таблица 3. Показатели белкового и холестеринового обмена

Таблица 4. Показатели массы тела и массового коэффициента печени животных

Установлено, что в группе контроля введение 40% этанола в течение 4 нед. в дозе 7 мл/кг привело к изменению следующих биохимических показателей крови. Среди маркеров цитолиза уровень АлАТ оставался без изменения, уровень АсАТ снизился в 8,9 раза (p<0,05). Коэффициент де Ритиса при этом снизился в 12 раз, уровень ЛДГ повысился в 4,8 раза (см. табл. 1). Снижение активности АсАТ может быть связано с уменьшением количества функционирующих гепатоцитов и нарушением образования этого фермента в печени.

Уровень билирубина в результате 4-недельного введения этанола не изменился, однако соотношение фракций прямого (конъюгированного) и токсичного непрямого (неконъюгированного) билирубина существенно изменилось: после воздействия этанола бóльшая доля стала приходиться на непрямой билирубин (см. табл. 2). Это является показателем нарушения функции гепатоцитов, связанного с инактивацией (конъюгированием) непрямого билирубина. Уровень активности ГГТ в результате воздействия этанола снизился в 4,4 раза. Поскольку фермент ГГТ образуется в клетках печени, снижение его уровня под действием этанола свидетельствует о снижении функциональной активности гепатоцитов или об уменьшении количества функционирующих клеток печени. Повышение активности щелочной фосфатазы в группе контроля является признаком холестаза.

При исследовании параметров белкового обмена было выявлено, что под действием этанола на 26,5% повысился уровень общего белка сыворотки крови (см. табл. 3). При этом на 14,6% снизился уровень альбумина и почти вдвое повысился уровень глобулинов, т. е. содержание белка менялось за счет глобулинов. Поскольку альбумин синтезируется в клетках печени, его снижение свидетельствует о нарушении белок-синтетической функции гепатоцитов. Рост уровня глобулинов может соотноситься с повышенным образованием белков, связанных с развитием патологического процесса (белки острой фазы, TNFα, иммуноглобулины и т. д.). Уровень холестерина сыворотки под действием алкоголя никак не изменился.

Все тестируемые вещества оказали положительное действие на оцениваемые биохимические показатели крови. Под их влиянием наблюдали: нормализацию (повышение) уровня АлАТ и ГГТ, резко сниженных в сравнении с нормой из-за нарушения функциональной активности гепатоцитов в результате воздействия алкоголя; сдвиг в сторону нормы (повышение) коэффициента де Ритиса; снижение уровня ЛДГ и щелочной фосфатазы; нормализацию соотношения прямого и непрямого билирубина (повышение прямого и снижение непрямого), нормализацию (снижение) уровня общего белка и соотношения альбумина и глобулинов (повышение концентрации альбумина и снижение концентрации глобулинов). На уровень холестерина исследованные вещества не повлияли.

Сравнение групп по биохимическим показателям выявило, что КардиоОрганик® Омега-3 и Карсил® проявили более выраженный эффект, чем льняное масло. Так, на уровень АсАТ КардиоОрганик® Омега-3 оказал эффект в дозах 12,5 мг/кг и 25 мг/кг, а льняное масло — лишь в дозе 12,5 мг/кг. В группе Карсила активность АсАТ и АлАТ была выше нормы. На уровень активности ЛДГ как КардиоОрганик® Омега-3, так и льняное масло оказали эффект при одинаковых дозах — 25 мг/кг. При введении льняного масла в дозе 25 мг/кг и Карсила в дозе 100 мг/кг снижение ЛДГ было более выраженным, чем при введении КардиоОрганика Омега-3 в дозе 25 мг/кг. Уровень билирубина общего и непрямого в группе льняного масла 25 мг/кг превышал норму. В то же время КардиоОрганик® Омега-3 в дозе 25 мг/кг оказывал наиболее выраженный положительный эффект на билирубиновый обмен, приводя к снижению концентрации непрямого билирубина. Аналогичный эффект наблюдался и при введении Карсила в дозе 100 мг/кг (см. табл. 3). Достоверное снижение уровня щелочной фосфатазы наблюдалось лишь при введении льняного масла в дозе 12,5 мг/кг, в то время как КардиоОрганик® Омега-3 приводил к достоверному снижению содержания щелочной фосфатазы при применении всех исследованных доз (12,5, 25 и 50 мг/кг). Под действием Карсила снижение уровня щелочной фосфатазы было недостоверным. КардиоОрганик® Омега-3 и Карсил® оказали более выраженный положительный эффект также на показатели белкового обмена по сравнению с льняным маслом, так как уровни глобулинов и альбумина в первых двух группах наиболее приближены к показателям интактной группы (см. табл. 3).

За время эксперимента наблюдалась положительная динамика массы тела без статистически значимого различия между группами. Лишь в группе Карсила прирост массы тела был достоверно ниже, чем в группе контроля. Массовый коэффициент печени в группе контроля увеличился по сравнению с интактными (нормой) на 26,9%. В группах крыс, которым вводили тестируемые вещества, массовый коэффициент печени был ниже, чем в группе контроля, хотя различия были статистически незначимыми. Наименьшие значения (3,03±0,17%) были в группе, которой вводили КардиоОрганик® Омега-3 в дозе 25 мг/кг (см. табл. 4).

При патоморфологическом анализе гистологических образцов печени было показано, что в группе контроля, по сравнению с группой интактных животных (рис. 1), в результате воздействия этанола появляются изменения, свидетельствующие о деструктивно-дегенеративных изменениях в печени и холестазе: нарушение структурной организации клеток, значительное сужение межклеточного пространства, повышенное кровенаполнение; разреженность цитоплазмы гепатоцитов (гидропическая дистрофия) (рис. 2, А). При большом увеличении (рис. 2, B, С) видны клетки без ядер, что является признаком фокального некроза гепатоцитов. В клетках выявляется сильно выраженная базофильная зернистость цитоплазмы — зернистая дистрофия. Наблюдается умеренная инфильтрация ткани печени лимфоидными клетками (рис. 2, С). Повышенного образования липидов под действием этанола не выявлено (рис. 2, D), т. е. выявляемая оптически разреженная цитоплазма в гепатоцитах при окрашивании гематоксилином и эозином связана с некротическими деструктивно-дегенеративными процессами, а не с накоплением в клетках жира. При окрашивании по Ван-Гизону выявляется повышенное образование коллагеновых волокон, преимущественно вокруг сосудов. Отдельные волокна также отмечены непосредственно в дольках печени, между гепатоцитами (рис. 2, E, F).

Рис. 1. Структурно-морфологические особенности печени крыс интактной группы (норма).

Рис. 2. Патоморфологические изменения печени крыс группы контроля (этанол + вода).

В результате воздействия исследованных веществ (льняное масло, КардиоОрганик® Омега-3 и Карсил®) было показано улучшение структурно-морфологической организации печени. Наблюдали уменьшение признаков гидропической и зернистой дистрофии, некроза гепатоцитов, а также фибротических изменений. Повышенного образования липидов в печени не было отмечено ни в одной группе.

Выявлены следующие особенности действия веществ в зависимости от доз. Патоморфологические изменения в печени под действием льняного масла в дозе 50 мг/кг практически не отличались от таковых в группе контроля. Наибольший эффект отмечен под действием льняного масла в дозах 12,5 мг/кг и 25 мг/кг. Для КардиоОрганика Омега-3 наибольший эффект на патоморфологические изменения в печени выявлен при дозе 25 мг/кг (рис. 3). В группах, в которых вводили Кардио­Органик® Омега-3, признаки гидропической и зернистой дистрофии были менее выражены, чем в соответствующих группах контроля с льняным маслом. В группе Карсила минимальными были признаки зернистой дистрофии и фибротических изменений (выявление коллагеновых волокон по Ван-Гизону), однако имели место признаки гидропической дистрофии (рис. 4).

Рис. 3. Патоморфологические изменения печени крыс при введении КардиоОрганика Омега-3 в дозе 25 мг/кг.

Рис. 4. Патоморфологические изменения печени крыс в группе Карсила 100 мг/кг.

В целом при сравнении гепатопротективного эффекта терпенсодержащей БАД КардиоОрганик® Омега-3 и препарата Карсил® можно выделить некоторые особенности. Под действием Карсила наблюдалось более выраженное снижение уровня активности ЛДГ в сравнении с эффектом КардиоОрганика Омега-3. Однако активность специфических маркеров цитолиза печени — ферментов АлАТ и АсАТ в группе Карсила превышала уровень нормы, причем повышение АсАТ было статистически значимое (см. табл. 2), что свидетельствует об активном процессе цитолиза гепатоцитов. Полученные результаты согласовывались с данными патоморфологических исследований печени, согласно которым в группах КардиоОрганика Омега-3 деструктивно-дегенеративные повреждения гепатоцитов (гидропическая дистрофия) были минимально выраженными. В то же время в печени крыс группы Карсила встречались гепатоциты с гидропической дистрофией, являющейся одной из стадий деструкции и некроза клеток. С другой стороны, Карсил® оказал более выраженный антифибротический эффект в печени. На уровень активности щелочной фосфатазы, ГГТ и билирубинового обмена КардиоОрганик® Омега-3 в оптимальной дозе 25 мг/кг оказал равноценный эффект в сравнении с Карсилом в дозе 100 мг/кг, нормализовав активность ферментов и соотношение уровней прямого и непрямого билирубина (снижение концентрации токсичного непрямого, или неконъюгированного, билирубина и повышение концентрации прямого, конъюгированного билирубина). На показатели белкового обмена КардиоОрганик® Омега-3 и Карсил® оказывали равнонаправленный эффект, вызывая снижение концентрации глобулинов, в состав которых входят белки острой фазы, и повышение концентрации альбуминов, что является показателем улучшения белок-синтетической функции печени. При этом в группе, которой вводили Карсил, различия уровней альбумина и глобулина по сравнению с группой контроля были более выраженными.

Заключение

В ходе исследования установлено, что терпенсодержащая БАД КардиоОрганик® Омега-3 проявляет гепатопротективные свойства на модели алкогольного повреждения печени у крыс. Под ее действием нормализуются биохимические показатели крови (показатели АсАТ, ГГТ, щелочной фосфатазы, билирубинового и белкового обмена), снижаются выраженность гидропической и зернистой дистрофии гепатоцитов и фибротических изменений в печени и массовый коэффициент печени. Показано, что по гепатопротективному эффекту КардиоОрганик® Омега-3 в исследованных дозах сопоставим с известным гепатопротектором — препаратом Карсил® в дозе 100 мг/кг, а по некоторым показателям даже превосходит его. Наиболее выраженный гепатопротективный эффект КардиоОрганика Омега-3 на модели алкогольного повреждения печени выявлен при введении в дозе 25 мг/кг. Все это позволяет рассматривать терпенсодержащие соединения как перспективные гепатопротекторы.


Исследование проведено при поддержке ООО «Инитиум-Фарм».


Конфликт интересов: Маганова Ф.И., Лацерус Л.А. являются представителями компании ООО «Инитиум-Фарм».

Вклад авторов: Маганова Ф.И., Лацерус Л.А. — авторы идеи, научное консультирование, редактирование статьи; Выштакалюк А.Б., Парфенов А.А. — проведение исследования, анализ и статистическая обработка данных, написание статьи.

Литература
1. Li S., Tan H.-Y., Wang N. et al. Role of oxidative stress and antioxidants in liver diseases. Int J Mol Sci. 2015;16(11):26087–26124. DOI: 10.3390/ijms161125942.
2. Королева Л.Р. Современные гепатопротекторы. Российский медицинский журнал. 2005;67(2):35–37. [Koroleva L.R. Modern hepatoprotectors. Russian Medical Journal. 2005;67(2):35–37 (in Russ.)].
3. Хужаев Ш.К. Клинико-фармакологический подход к применению препарата Карсил форте при хроническом гепатите различной этиологии. В кн.: Сборник тезисов III Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Безопасность фармакотерапии: Noli Nocere!». Казань; 2020. [Khuzhaev Sh.K. Clinical and pharmacological approach to the use of Karsil forte in chronic hepatitis of various etiology. In the book: Collection of theses of the III All-Russian scientific-practical conference with international participation «Safety of pharmacotherapy: Noli Nocere!». Kazan; 2020 (in Russ.)].
4. Бусалаева Е.И., Тарасова Л.В., Матвеева Т.С. Гепатопротекторы в клинической практике. Алгоритм выбора. Здравоохранение Чувашии. 2015;2:56–64. [Busalaeva E.I., Tarasova L.V., Matveeva T.S. Hepatoprotectors in clinical practice. Selection algorithm. Health care of Chuvashia. 2015;2:56–64 (in Russ.)].
5. Лацерус Л.А. Применение терпенсодержащего препарата Абисил в лечении и профилактике хирургической инфекции. Российский биотерапевтический журнал. 2010;9(1):39–41. [Lacerus L.A. The use of the terpene-containing drug Abisil in the treatment and prevention of surgical infection. Russian Biotherapeutic Journal. 2010;9(1):39–41 (in Russ.)].
6. Latserus L.A. The effect of Abies sibirica L. terpenoids on the causative agents of pyoinflammatory diseases. In: The 15th International Congress PHYTOPHARM 2011. Nuremberg, Germany: 67–68.
7. Лацерус Л.А., Барышников А.Ю. Растительные терпеноиды как возможные противоопухолевые агенты. Российский биотерапевтический журнал. 2010;9(1):3–8. [Lacerus L.A., Baryshnikov A.Y. Plant terpenoids as possible antineoplastic agents. Russian Biotherapeutic Journal. 2010;9(1):3–8 (in Russ.)].
8. Nevzorova Y.A., Grossmann J., Trautwein C. Anti-tumorigenic and anti-angiogenic effects of natural conifer Abies sibirica terpenoids in vivo and in vitro. Biomed Pharmacother. 2017;89:386–395. DOI: 10.1016/j.biopha.2017.02.035.
9. ГОСТ № 33215–2014 от 9 ноября 2015 г. «Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила оборудования помещений и организации процедур». [GOST No. 33215–2014 dated November 09, 2015 "Guidelines for accommodation and care of animals. Environment, housing and managemaent" (in Russ.)].
10. Масловская А.А., Климович В.В., Кузнецов О.И., Булат А.В. Влияние однократного введения этанола на некоторые показатели метаболизма печени крыс. Журнал Гродненского государственного медицинского университета. 2007;3:29–30. [Maslovskaya A.A., Klimovich V.V., Kuznetsov O.I., Bulat A.V. Influence of a single injection of ethanol on some parameters of rat liver metabolism. Journal of the Grodno State Medical University. 2007;3:29–30 (in Russ.)].
11. Оценка лечебной эффективности новых лекарственных средств на экспериментальных моделях алкогольных гепатитов различной степени тяжести: методические рекомендации ФМБА России. М.; 2013. [Evaluation of the therapeutic efficacy of new drugs on experimental models of alcoholic hepatitis of varying severity: Methodical recommendations of the FMBA of Russia. M.; 2013 (in Russ.)].
12. Петров А.Н., Шевчук М.К., Георгианова Е.К. и др. Разработка экспериментальных моделей алкогольного гепатита различной степени тяжести. Токсикология. 2015;16:187–202. [Petrov A.N., Shevchuk M.K., Georgianova E.K. et al. Development of experimental models of alcoholic hepatitis of varying severity. Toxicology. 2015;16:187–202 (in Russ.)].

Лицензия Creative Commons
Контент доступен под лицензией Creative Commons «Attribution» («Атрибуция») 4.0 Всемирная.

Поделитесь статьей в социальных сетях

Порекомендуйте статью вашим коллегам

Предыдущая статья
Следующая статья

Авторизируйтесь или зарегистрируйтесь на сайте для того чтобы оставить комментарий.

зарегистрироваться авторизоваться
Наши партнеры
Boehringer
Jonson&Jonson
Verteks
Valeant
Teva
Takeda
Soteks
Shtada
Servier
Sanofi
Sandoz
Pharmstandart
Pfizer
 OTC Pharm
Lilly
KRKA
Ipsen
Gerofarm
Egis
Dr. Reddis
Зарегистрируйтесь сейчас и получите доступ к полезным сервисам:
  • Загрузка полнотекстовых версий журналов (PDF)
  • Подписка на актуальные медицинские новости
  • Список избранных статей по Вашей специальности
  • Анонсы конференций и многое другое

С нами уже 50 000 врачей из различных областей.
Присоединяйтесь!
Если Вы врач, ответьте на вопрос:
Дисфагия это:
Нажимая зарегистрироваться я даю согласие на обработку моих персональных данных
Если Вы уже зарегистрированы на сайте, введите свои данные:
Войти
Забыли пароль?
Забыли пароль?

Информация на данном сайте предназначена только для специалистов в сфере медицины, фармацевтики и здравоохранения.
Своим согласием Вы подтверждаете что являетесь специалистом в данной области.

Согласен