Показатели иммунного статуса пациентов с рецидивирующей герпетической инфекцией

лет

предоставляем актуальную медицинскую информацию от ведущих специалистов, помогая врачам в ежедневной работе

Присоединяйтесь!

Уведомления

Личный
кабинет

лет

Присоединяйтесь!

лет

Присоединяйтесь!

Показатели иммунного статуса пациентов с рецидивирующей герпетической инфекцией

Инфекционные болезни Иммунология

2979

28 июня 2024

ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Россия

Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова, Нальчик

Введение: актуальность проблемы герпетической инфекции (ГИ) для здравоохранения обусловлена повсеместным распространением вирусов простого герпеса (ВПГ) 1-го и 2-го типа. Иммунопатогенез ГИ у пациентов с ее рецидивирующим течением сложен и включает как гиперактивацию клеточного иммунитета, так и недостаточность системы интерферонов (ИФН).

Цель исследования: оценить динамику показателей иммунного статуса и системы ИФН у пациентов с диагностированной рецидивирующей ГИ на фоне лечения по стандартной схеме.

Материал и методы: в исследовании приняли участие 22 пациента в возрасте от 18 до 60 лет с лабораторно подтвержденной рецидивирующей инфекцией ВПГ 1-го и/или 2-го типа. В течение двух лет на базе клинического отдела инфекционной патологии ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора у пациентов изучали параметры иммунного статуса и интерфероновой системы: содержание ИФН-α и ИФН-γ, показатели В-лимфоцитов (CD20+) и основных субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD16+), экспрессию CD95+, иммунорегуляторный индекс.

Результаты исследования: при анализе количества сывороточного и спонтанного ИФН, а также его индуцированной продукции лейкоцитами была выявлена недостаточность интерфероновой системы различной степени с улучшением показателей в динамике на фоне лечения. Угнетение системы ИФН у пациентов с рецидивирующей ГИ сопровождалось выраженной функциональной дисрегуляцией иммунной системы в виде ранней активации цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+), а также снижением количества натуральных киллеров ( CD16+). Достоверное увеличение абсолютного и относительного числа Т-лимфоцитов (CD3+) на фоне снижения абсолютного количества Т-хелперов (CD4+), доли цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+), В-лимфоцитов сопровождалось рецидивами ГИ в 85% случаев и необходимостью использования противовирусных препаратов при каждом обострении за время наблюдения.

Заключение: выявленные в ходе исследования нарушения иммунного статуса свидетельствуют как о важности иммунологических аспектов в патогенезе ГИ и развитии ее рецидивов, так и о необходимости иммунокоррекции у таких пациентов.

Ключевые слова: вирус простого герпеса, герпетическая инфекция, угнетение системы интерферонов, Т-клеточный иммунитет.

Indicators of immune status in patients with recurrent herpes infection

Zh.B. Ponezheva¹, I.V. Mannanova¹, M.Kh. Kardanova², L.V. Kardanova², R.Z. Alakaev²

¹Central Research Institute of Epidemiology of the Russian Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-Being, Moscow

²Kh.M. Berbekov Kabardian-Balkar State University, Nalchik

Background: the herpes infection (HI) relevance for public health is due to the widespread prevalence of herpes simplex virus types 1 (HSV-1) and 2 (HSV-2). The HI immunopathogenesis in patients with its recurrent course is complex and includes both cell-mediated immune response hyperactivation and interferon (IFN) system deficiency.

Aim: to evaluate the changes in indicators of the immune status and the IFN system in patients with diagnosed recurrent HI during treatment according to the standard regimen.

Patients and Methods: the study involved 22 patients aged 18 to 60 years with laboratory-confirmed recurrent HSV-1 and/or HSV-2. On the basis of the Clinical Department of Infectious Pathology (the Central Research Institute of Epidemiology of the Russian Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-Being), the following parameters of the immune status and IFN system were studied in patients for two years: IFN-α and IFN-γ content, B-cell (CD20+) indices and main T-cell subpopulations count (CD4+, CD8+, CD16+), CD95 expression+, immunoregulatory index.

Results: when analyzing the serum count and spontaneous IFN, as well as its induced production by leukocytes, IFN system deficiency of various stages was revealed with a trend improvement during treatment. IFN system inhibition in patients with recurrent HI was accompanied by significant functional immune dysregulation in the form of early cytotoxic T-cells (CD8+) activation, as well as a decrease in the natural killer cells (CD16+) number. A significant increase in the absolute and relative number of T-cells (CD3+) (during a decrease in the absolute number of helper T-cells (CD4+), the proportion of cytotoxic T-cells (CD8+) and B-cells) was accompanied by recurrent HI in 85% of cases and the need to use antiviral drugs with each exacerbation during follow-up.

Conclusion: the immune status disorders revealed during the study indicated both the importance of immunological aspects in the HI pathogenesis and its relapses progression, as well as the need for immunocorrection in such patients.

Keywords: herpes simplex virus, herpes infection, interferon system inhibition, T-cell immunity.

For citation: Ponezheva Zh.B., Mannanova I.V., Kardanova M.Kh., Kardanova L.V., Alakaev R.Z. Indicators of immune status in patients with recurrent herpes infection. RMJ. 2024;6:–38.

Для цитирования: Понежева Ж.Б., Маннанова И.В., Карданова М.Х., Карданова Л.В., Алакаев Р.З. Показатели иммунного статуса пациентов с рецидивирующей герпетической инфекцией. РМЖ. 2024;6:35-38.

Введение

Герпетическая инфекция (ГИ) — хроническое рецидивирующее заболевание, возникающее в результате инфицирования вирусом простого герпеса (ВПГ) 1-го и/или 2-го типа. Возможность поражения внутренних органов, полиморфизм клинических проявлений, хроническое течение с тенденцией к рецидивированию — все это ставит ГИ в ряд заболеваний, имеющих медико-социальное значение для здравоохранения в России и в мире. ВПГ 1-го и 2-го типа относят к подсемейству α-герпесвирусов (Alphaherpesvirinae). Эти вирусы распространены повсеместно, инфицированность населения ими очень высока. По данным Всемирной организации здравоохранения, во всем мире около 67% (3,7 млрд) взрослых в возрасте до 50 лет инфицированы ВПГ 1-го типа, наиболее часто вызывающим лабиальный герпес. Инфицированность ВПГ 2-го типа, чаще вызывающим генитальный герпес, среди пациентов в возрасте от 15 до 49 лет оценивается на уровне 13% (491 млн человек)¹.

Обладая тканевым тропизмом к эпителиальным и нервным клеткам, способностью к постоянной персистенции в организме инфицированного человека и латентному течению, ВПГ создает постоянную угрозу развития инфекционного процесса. ГИ сопровождается развитием специфического гуморального и клеточного иммунного ответа. Рецидивирующее течение ГИ обусловлено тем, что ВПГ в нервных ганглиях сохраняется не в виде интактных частиц, а в форме субвирусных ДНК-белковых структур. Именно поэтому, даже при высоком титре антител, защита от вируса неэффективна [1]. Особую роль в предупреждении рецидива ГИ играет клеточный иммунитет, опосредованный CD4+, CD16+-клетками и макрофагами [2].

Наиболее важным звеном иммунопатогенеза рецидивирующего течения ГИ является недостаточность синтеза интерферонов (ИФН). Описано угнетение интерфероновой реакции при ГИ, снижение способности лимфоцитов к синтезу ИФН-α, ИФН-γ, ИФН-β. По данным литературы, уровни этих ИФН у больных рецидивирующей ГИ (РГИ) могут снижаться в 10–20 раз по сравнению с референтными значениями. Кроме того, отмечено местное подавление образования ИФН в очагах герпетических поражений [3].

Таким образом, необходимо уделять большое внимание изучению состояния иммунной системы у пациентов с РГИ, включая анализ интерферонового статуса, поскольку именно ИФН являются ключевыми медиаторами противовоспалительного процесса и угнетение их продукции играет ключевую роль в развитии рецидивирующего течения ГИ.

Цель исследования: оценить динамику показателей иммунного статуса и системы ИФН у пациентов с диагностированной РГИ на фоне лечения по стандартной схеме.

Материал и методы

На базе клинического отдела инфекционной патологии ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора обследовано 22 пациента в возрасте от 18 до 60 лет с лабораторно и клинически подтвержденной РГИ (средний возраст пациентов 44,5 [36,50; 53,50] года, из них 18 (81,8%) женщин). У всех пациентов в анамнезе отмечены эпизоды герпетических высыпаний в лабиальной области или в зоне гениталий. Пациенты наблюдались в течение двух лет.

Критерии включения в исследование: рецидивирующее течение ГИ (4 и более эпизодов в год) со среднетяжелым течением заболевания; возраст пациентов от 18 до 80 лет включительно; лабораторное и клиническое подтверждение заболевания, связанного с ВПГ 1-го и/или 2-го типа; подписанное информированное согласие пациента на участие в исследовании.

Первый этап исследования включал опрос и изучение анамнеза пациентов, физикальное обследование, термометрию, оценку наличия и выраженности системных и местных проявлений ГИ, а также ее осложнений. На первом этапе был проведен забор крови с последующим определением содержания ИФН-α и ИФН-γ, показателей минимальной иммунной панели (Т-лимфоциты (CD3+), Т-хелперы (CD4+), Т-цитотокcические лимфоциты (CD8+), иммунорегуляторный индекс (ИРИ), В-лимфоциты, активированные Т-лимфоциты, фенотип лимфоцитов (HLA), натуральные киллеры (NK), общие и активированные Т-клетки с их маркерами). По результатам обследования назначена стандартная противовирусная и симптоматическая терапия согласно клиническим рекомендациям².

Второй этап исследования (через 30 дней после окончания противовирусного лечения) включал в себя физикальное обследование пациентов и повторный забор крови для оценки изменений иммунологических показателей в динамике.

В течение всего периода наблюдения пациенты обращались за медицинской помощью при развитии рецидива заболевания, заполняли 1 раз в 3 мес. дневник самонаблюдения с указанием количества рецидивов, их локализации, сроков эпителизации и общего состояния.

Анализ интерферонового статуса, включающий определение количества сывороточного и спонтанного ИФН, а также индуцированной продукции ИФН-α и ИФН-γ лейкоцитами крови, проводили по методу С.С. Григорян [4]. Оценивали интерфероноподобную активность сыворотки крови и надосадочной жидкости культур клеток крови, инкубированных в среде с добавлением фитогемагглютинина или вируса болезни Ньюкасла, а также без индукции. За референтные значения при оценке индуцированной продукции ИФН-α принимали значения 320–640 пг/мл, ИФН-γ — 64–128 пг/мл. Состояние интерфероновой системы при снижении уровня продуцируемого ИФН-α в 2 раза оценивали как недостаточность 1-й степени, в 3 раза — 2-й степени, а в 4 раза — как недостаточность 3-й степени или депрессию интерфероновой системы. Снижение концентрации индуцированного ИФН-γ <64 пг/мл оценивали как недостаточность 1-й степени, 16–32 пг/мл — 2-й степени, <16 пг/мл — как недостаточность 3-й степени или депрессию интерфероновой системы.

Исследование стандартной панели субпопуляционного состава лимфоцитов в периферической крови проводили методом проточной цитофлюорометрии на цитометре EPICS XL (Beckman Coulter, США).

Статистический анализ полученных результатов проводили с использованием программ StatTech v. 4.1.5 (ООО «Статтех», Российская Федерация) и Microsoft Office Excel 2016 (Microsoft, США) с использованием методов параметрической и непараметрической статистики. В случае отсутствия нормального распределения количественные данные описывали с помощью медианы (Me) и нижнего и верхнего квартиля [Q1; Q3]. При сравнении количественных показателей в двух связанных группах применяли критерий Уилкоксона. Для оценки достоверности использовали критерий Стьюдента. Критерием статистической значимости полученных результатов принята величина p<0,05.

Результаты и обсуждение

Клиническая картина РГИ у обследованных пациентов характеризовалась следующими симптомами: жжение, зуд, боль в месте высыпаний, повышение температуры тела. В анамнезе пациентов были сопутствующие заболевания: желудочно-кишечного тракта — у 17 (77,3%) пациентов, сердечно-сосудистые — у 5 (22,7%), органов дыхания — у 2 (9,1%), органов мочевыделительной системы — у 2 (9,1%) и отягощенный аллергологический анамнез у 1 (4,5%).

Всем пациентам проводили этиотропную терапию противовирусными препаратами (ацикловир, валацикловир, фамцикловир) согласно клиническим рекомендациям по лечению простого герпеса у взрослых.

При анализе частоты рецидивов за период наблюдения было выявлено, что на фоне стандартной противовирусной терапии ГИ рецидив наблюдали у 17 (85%) пациентов: у 2 (11,8%) — рецидив генитальной герпетической инфекции, вызванной ВПГ 2-го типа, у 7 (31,8%) — одномоментно рецидив лабиального и генитального герпеса (вызванного ВПГ 1-го типа и ВПГ 2-го типа соответственно), у 8 (36,3%) — лабиальную ГИ, вызванную ВПГ 1-го типа. Увеличение частоты рецидивов отметил 1 (4,5%) пациент с РГИ (лабиальная + генитальная), уменьшение — 3 (13,6%), все с лабиальным герпесом. Во время каждого рецидива пациенты получали стандартную противовирусную терапию. У 3 (13,6%) пациентов рецидивов ГИ за время наблюдения не было.

Анализ интерферонового статуса пациентов с РГИ при первом обследовании выявил угнетение системы ИФН различной степени выраженности в 100% случаев, которая сопровождалась снижением продукции ИФН-α и ИФН-γ. При повторном исследовании, по окончании противовирусной терапии и купировании острых проявлений ГИ, отмечалось улучшение показателей с нормальной продукцией ИФН у 1 (4,5%) и уменьшение степени недостаточности интерфероновой системы у 2 (9,1%) пациентов. Нарушение интерферонового статуса у пациентов с РГИ сопровождалось выраженной функциональной дисрегуляцией иммунной системы в виде ранней активации цитотоксических Т-лимфоцитов, а также снижением как абсолютного, так и относительного количества NK (см. рисунок).

Рисунок. Состояние интерферонового статуса у пациентов с РГИ до и после лечения

При сравнительном анализе иммунологических показателей у больных РГИ на разных этапах исследования были выявлены различные изменения клеточного иммунитета. После лечения достоверно увеличилось абсолютное и относительное число Т-лимфоцитов (CD3+) на фоне снижения абсолютного количества Т-хелперов (CD4+), доли цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+), уровня В-лимфоцитов, количества лимфоцитов с фенотипом HLA-DR+ и их активированной субпопуляции. При этом ГИ рецидивировала у 17 (85%) пациентов, что потребовало применения противовирусных препаратов. Важно отметить достоверное снижение количества NK. Динамика иммунологических показателей у пациентов с РГИ представлена в таблице.

Таблица. Динамика иммунологических показателей у пациентов с РГИ, Ме [Q1; Q3]

Во многих исследованиях показано отклонение параметров как интерферонового статуса, так и Т-клеточного звена иммунитета у больных РГИ [5, 6]. Кроме того, известно, что противовирусная терапия ацикловиром и его аналогами может способствовать появлению штаммов ВПГ 1-го и 2-го типа, резистентных к ацикловиру [7]. Таким образом, устойчивость к противовирусной терапии, сохранение выраженного угнетения системы ИФН и отклонения Т-клеточного иммунитета способствуют развитию РГИ.

Говоря об эпизодах рецидива ГИ у пациентов в период проведения исследования, следует отметить, что каждое обострение требовало дообследования на сочетанные инфекции у всех пациентов с ухудшением состояния. Спустя 6 мес. наблюдения у пациентов с частыми рецидивами ГИ выявлена сочетанная герпесвирусная инфекция (ВПГ + активация хронической инфекции вирусом Эпштейна — Барр), у 2 пациентов РГИ сочеталась с бактериальной инфекцией мочевыводящей системы (уреаплазмоз). Такие пациенты требуют тщательного обследования и междисциплинарного подхода, что позволит значительно повысить клиническую эффективность терапии РГИ.

Заключение

Установлено, что в патогенезе РГИ, помимо способности ВПГ 1-го и 2-го типа к латентному течению и постоянному персистированию в организме, ключевую роль играют различные отклонения иммунного ответа инфицированного. Именно поэтому для пациентов с РГИ целесообразно расширенное обследование с оценкой иммунного статуса и состоятельности интерфероновой системы. Обнаруженные в ходе нашего исследования иммунные нарушения, в том числе угнетение интерферонового статуса у всех пациентов с РГИ, свидетельствуют о необходимости проведения комплексной терапии ГИ этиотропными средствами вместе с препаратами иммуномодулирующего действия для коррекции дефектов противовирусной защиты.

¹Информационный бюллетень ВОЗ: Вирус простого герпеса. 05.04.2023. (Электронный ресурс.) URL: https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/herpes-simplex-virus (дата обращения: 11.01.2024).

²Клинические рекомендации. Простой герпес у взрослых. Некоммерческое партнерство «Национальное научное общество инфекционистов» (ННОИ). (Электронный ресурс.) URL: https://edu.nmrc.ru/wp-content/uploads/2022/04/kr_prostoy_gerppes-1.pdf (дата обращения: 11.01.2024).

1. Мельниченко А.В., Алимбарова Л.М., Трегубова М.И. и др. Клинико-вирусологическая и иммунологическая характеристика больных с разными формами герпесвирусных инфекций. Лечение и профилактика. 2017;4(24):7–13. [Melnichenko A.V., Alimbarova L.M., Tregubova M.I. et al. Clinical virological and immunological characteristics of patients with different forms of herpes virus infections. Treatment and Prevention. 2017;4(24):7–13 (in Russ.)].
2. Злотникова М.В., Новикова И.А. Механизмы естественного и адаптивного иммунитета при инфекциях, вызванных вирусами простого герпеса 1 и 2 типа. Проблемы здоровья и экологии. 2014;1(39):7–14. [Zlotnikova M.V., Novikova I.A. Mechanisms of natural and adaptative immunity in infections associated with herpes simplex of types 1 and 2. Health and Ecology Issues. 2014;(1):7–14 (in Russ.)]. DOI: 10.51523/2708-6011.2014-11-1-1.
3. Lieberman L.A., Hunter C.A. Regulatory pathways involved in the infection-induced production of IFN-gamma by NK cells. Microbes Infect. 2002;4(15):1531–1538. DOI: 10.1016/s1286-4579(02)00036-9.
4. Григорян С.С., Майоров И.А., Иванова А.М., Ершов Ф.И. Оценка интерферонового статуса людей по пробам цельной крови. Вопросы вирусологии. 1988;4:433–436. [Grigorian S.S., Maĭorov I.A., Ivanova A.M., Ershov F.I. Evaluation of the interferon status of human subjects by whole-blood specimens. Vopr Virusol. 1988;33(4):433–436 (in Russ.)]. PMID: 2461615.
5. Danastas K., Miranda-Saksena M., Cunningham A.L. Herpes Simplex Virus Type 1 Interactions with the Interferon System. Int J Mol Sci. 2020;21(14):5150. DOI: 10.3390/ijms21145150.
6. Sainz B.Jr., Halford W.P.. Alpha/Beta interferon and gamma interferon synergize to inhibit the replication of herpes simplex virus type 1. J Virol. 2002;76(22):11541–11550. DOI: 10.1128/jvi.76.22.11541-11550.2002.
7. Schalkwijk H.H., Snoeck R., Andrei G. Acyclovir resistance in herpes simplex viruses: Prevalence and therapeutic alternatives. Biochem Pharmacol. 2022;206:115322. DOI: 10.1016/j.bcp.2022.115322.