С нами уже 54 633 врача из различных областей
В нашей базе более 100 000 статей присоединяйтесь!

Диагностическое значение протеомного анализа жидкости передней камеры глаза при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме

Импакт фактор - 0,628*

*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ

Журнал входит в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК.

Ключевые слова
Похожие статьи в журнале РМЖ

Читайте в новом номере

РМЖ «Клиническая Офтальмология» №1 от 07.03.2017 стр. 13-17
Рубрика: Офтальмология
Протеомный анализ является одним из новых направлений исследований состава биологических жидкостей. Главная цель клинической протеомики – обнаружение нового белкового или пептидного биомаркера, связанного с определенным заболеванием. В последние годы данный метод исследования приобретает большую актуальность и в офтальмологии.
Цель исследования: определить протеомный состав жидкости передней камеры глаза (ПКГ) и его различия при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме (ПОУГ) и псевдоэксфолиативном синдроме (ПЭС).
Материал и методы: в исследование были включены 29 образцов жидкости ПКГ пациентов с катарактой, глаукомой в сочетании с ПЭС и без него. Забор жидкости ПКГ осуществлялся во время первого этапа операции экстракции катаракты. Для каждого образца проводилась высокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометрией в 3 технических повторах. Анализ аннотации белков жидкости ПКГ проводился с помощью базы данных Gene Ontology (GО).
Результаты: в работе найдены 263 белковые группы, характеризующие протеом жидкости ПКГ. Большая часть белков (148 из 263) была обнаружена во всех группах. В соответствии с классификацией GО, большинство выделенных белковых групп участвуют в регуляции протеолиза. Среди белков жидкости ПКГ чаще встречаются аннотированные как обладающие активностью в отношении ингибирования эндопептидаз. Преобладающим молекулярным процессом в протеоме жидкости ПКГ является негативная регуляция пептидазной активности, важная для защиты жидкости ПКГ от протеолиза. Клеточная локализация белков аннотирована как принадлежность к внеклеточному пространству. 
Заключение: полученные данные позволяют оценить различия в протеомном составе внутриглазной жидкости в представленных группах больных. Найдена тенденция к возникновению различий состава протеома жидкости ПКГ у больных с ПЭС и без него. Проведение протеомных исследований глазной жидкости является перспективным, т. к. дает возможность разработки методов диагностики и лечения заболеваний глаза. 

Ключевые слова: протеомный анализ, жидкость передней камеры глаза, катаракта, глаукома, псевдоэксфолиативный синдром.

Для цитирования: Самохина Н.И., Кочергин С.А., Алексеев И.Б. Диагностическое значение протеомного анализа жидкости передней камеры глаза при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме // РМЖ. Клиническая офтальмология. 2017. №1. С. 13-17
Diagnostic value of the anterior chamber's fluid proteomic analysis in patients with cataract, primary open-angle glaucoma and pseudoexfoliation syndrome

Samokhina N.I., Kochergin S.A., Alexeev I.B. 

Russian medical Academy of postgraduate education, Moscow

Proteomic analysis is perspective for investigation of  body fluids composition. Proteomics is highly useful in identification of candidate biomarkers (body fluids proteins that are of value for diagnosis). Recently this analysis is used in ophthalmology.
Aim: to analyze  proteomic composition  of anterior chamber's fluid and its differences in cataract, primary open angle glaucoma and pseudoexfoliation syndrome.
Material and methods: twenty nine human aqueous humor samples from patients with eye diseases (cataract, glaucoma with and without pseudoexfoliation syndrome) were characterized by high-resolution chromato-mass-spectrometry. Fluid of the anterior chamber  was obtained during first stage of cataract surgery. Gene Ontology classifier was used to annotate the proteins.
Results: 263 protein groups were identified. Most identified proteins (148 out of 263) were found in all groups. According to Gene Ontology, main molecular function of most proteins was the endopeptidase inhibitor activity and regulation of proteolysis. The trend to difference in proteomic composition was identified in patients with pseudoexfoliation syndrome and without it.
Conclusions: received data shows the difference in proteomic composition of anterior chamber's fluid of patients with cataract, pseudoexfoliation syndrome and primary open-angle glaucoma. Proteomic analysis of eye fluids permits to develop new methods of diagnosis and treatment of eye diseases.
Keywords: proteomic analysis, aqueous humor, cataract, glaucoma, pseudoexfoliation syndrome.

For citation: Samokhina N.I., Kochergin S.A., Alexeev I.B. Diagnostic value of the anterior
chamber's fluid proteomic analysis in patients with cataract, primary open-angle glaucoma and pseudoexfoliation syndrome // RMJ. Clinical ophthalmology. 2017. № 1. P. 13–17.

Статья посвящена диагностическому значению протеомного анализа жидкости передней камеры глаза при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме

    Протеомный анализ является одним из новых направлений исследований состава биологических жидкостей. Протеомика – наука, основным предметом изучения которой являются белки, их функции и взаимодействия в живых организмах, в т. ч. в человеческом. Основная ее задача – количественный анализ экспрессии белков в клетках в зависимости от их типа, состояния или влияния внешних условий [1]. Протеомика осуществляет сравнительный анализ больших групп белков – от всех белков, вовлеченных в тот или иной биологический процесс, до полного протеома (совокупности всех белков организма) [2]. Традиционно изучение белков являлось одним из разделов биохимии, но после определения структуры всей геномной ДНК человека и ряда других организмов у исследователей белков появились новые методы, с которыми и связывают появление в 1997 г. нового термина «протеомика» [3]. В частности, появились исчерпывающие базы данных, содержащие последовательности всех белков человека, а также их протеолитических ферментов, полученных в стандартных условиях. Это позволяет идентифицировать белки по молекулярной массе их фрагментов методом масс-спектрометрии. Поскольку протеомика оперирует большим объемом данных, для обработки которых требуются специализированные алгоритмы и большие вычислительные мощности, она тесно связана с биоинформатикой.
    В последние годы протеомный анализ стал неотъемлемой частью биомедицинских исследований [4]. Главной целью клинической протеомики является обнаружение нового белкового или пептидного биомаркера, который связан с определенным заболеванием. Биомаркер – молекула, наличие или отсутствие которой позволяет сделать вывод о протекании определенного клеточного процесса или определить тип клетки. Сравнение протеомов здорового человека и больного позволяет выявить конкретные белки, потенциально вовлеченные в развитие болезни, которые в дальнейшем могут стать мишенями для новых лекарственных препаратов. Кроме того, если такие белки уже известны, анализ протеома может использоваться как метод ранней диагностики.
    Одним из основных методов протеомики является масс-спектрометрия белков, которая позволяет установить количественный и качественный состав в исследуемом образце, будь то очищенный и выделенный белок или клеточный лизат. В клинической практике установление новых биомаркеров может помочь в разработке скрининговых методов для ранней диагностики заболевания.
    В настоящее время в медицине применение методов протеомного анализа позволяет выявить маркеры онкологических заболеваний на их ранней стадии [5–7]. Есть работы по диагностике хронических дерматозов и аутоиммунных заболеваний кожи методом протеомного анализа [8]. Определен протеомный профиль мочи пациентов с хроническим гломерулонефритом,  выявлены белки-маркеры, ответственные за разные фазы течения патологического процесса [9].
    В последнее время метод протеомного анализа приобретает большую актуальность и в офтальмологии. С помощью масс-спектрометрии были исследованы слеза и жидкость ПКГ, забор которых осуществлялся при различных заболеваниях [10–13], в частности, при глаукоме.
    Жидкость ПКГ (син.: водянистая влага (ВВ)) вырабатывается пигментным и непигментным эпителием цилиарного тела [14]. Секреция происходит со скоростью 2–3 мкл/мин. Человеческий глаз производит от 3 до 9 мл ВВ в сутки. Функции ВВ – обеспечение питанием бессосудистых тканей глаза (хрусталика, стекловидного тела, роговицы) и удаление шлаковых метаболитов. Основная трудность  протеомного исследования ПКГ заключается в небольшом количестве ее объема, который можно получить из одного глаза. Так как общий объем ВВ в передней камере не превышает 150–200 мкл [15] и с возрастом уменьшается [16], трудно собрать больше 100–150 мкл.
    В состав жидкости ПКГ входит около 99% воды и менее 1% белков, среди которых преобладают фракции альбуминов, глобулины и трансферрин. По сравнению с сывороткой крови ВВ содержит гораздо меньше белка (от 2,4 до 3,7  мг/мл) [17]. Также в жидкости ПКГ были обнаружены различные аминокислоты (лизин, гистидин, триптофан),  ферменты (протеаза), гиалуроновая кислота (ГК).
    Среди белков жидкости ПКГ у пациентов с глаукомой идентифицированы матриксные металлопротеиназы [18], которые осуществляют лизис базальных мембран и гидролиз всех существующих компонентов межклеточного матрикса и активируют связанные с ним ангиогенные факторы роста [19, 20]. Также в жидкости ПКГ выделены ангиогенный фактор VEGF А [21] и фибронектин [22].
    Фибронектин – гликопротеин внеклеточного матрикса, выполняет регуляторную и стабилизирующую функции в межклеточных взаимодействиях и является общей адгезивной молекулой для соединительной ткани (тканевая форма), плазмы крови и других биологических жидкостей (плазменная форма). По литературным данным, фибронектин определяется в составе псевдоэксфолиативного материала и во всех структурах дренажной системы глаза [23].
    В нескольких исследованиях обнаружена более высокая концентрация фибронектина в жидкости ПКГ у пациентов с глаукомой [24], причем при псевдоэксфолиативной глаукоме уровень этого гликопротеина значительно выше, чем при ПОУГ. Авторы связывают это с повреждением и нарушенной проницаемостью гематоофтальмического барьера [22]. В другом исследовании у пациентов без подтвержденного диагноза глаукомы с ПЭС был определен более высокий уровень фибронектина в жидкости ПКГ, чем у пациентов без ПЭС [25].
    Также в жидкости ПКГ пациентов с псевдоэксфолиативной глаукомой были обнаружены более высокие уровни металлопротеиназ 2 и 3 типа и эндогенного ингибитора металлопротеиназы-2. Это свидетельствует о нарушении баланса между металлопротеиназами и их эндогенными ингибиторами и может быть одним из звеньев патогенеза ПЭС.
    При ПОУГ в жидкости ПКГ были обнаружены более высокие уровни растворимого CD44 – интегрального клеточного гликопротеина, играющего важную роль в межклеточных взаимодействиях, клеточной адгезии и миграции. Это рецептор для ГК, некоторых других лигандов, а также, возможно, матриксных металлопротеиназ [26]. Авторы выдвинули рабочую гипотезу о том, что ПОУГ биохимически характеризуется снижением концентрации ГК в жидкости ПКГ и повышением экспрессии рецептора CD44 для ГК, что, в свою очередь, может влиять на трабекулярный аппарат и выживаемость ганглионарных клеток сетчатки.
    В нескольких исследованиях определяли уровень антител сыворотки крови пациентов с глаукомой. Были обнаружены антитела к Нsp [27], γ-енолазе [28], белку, стимулирующему активацию аденилатциклазы [29] и гликозаминогликанам [30]. Также были определены повышенные уровни антител к антигенам сетчатки и другим структурам глаза в сыворотке крови больных глаукомой [31–33]. В жидкости ПКГ пациентов с глаукомой нормального давления тоже обнаружили повышенные уровни антител к антигенам сетчатки по сравнению с таковыми у пациентов из группы контроля [34].
    Цель исследования: определить протеомный состав жидкости ПКГ и его различия при катаракте, ПОУГ и ПЭС.

    Материал и методы

    Под наблюдением находились 29 пациентов в возрасте от 45 до 82 лет. 1-ю группу (контрольную) составили пациенты с катарактой (11 человек), не имеющие другой офтальмопатологии. Во 2-ю группу вошли пациенты с катарактой и ПЭС без подтвержденного диагноза глаукомы (5 человек). 3-ю группу составили пациенты с катарактой и открытоугольной глаукомой (7 человек). В 4-ю группу вошли пациенты с катарактой, ПОУГ и ПЭС (6 человек) (табл. 1). 

Таблица 1. Характеристика выборки исследования

    В исследование включались пациенты, не имеющие тяжелых соматических заболеваний, хронических системных заболеваний, не переносившие за последний год лазерные операции на исследуемом глазу и не имеющие в анамнезе хирургических вмешательств на глазном яблоке.
    Пациентам всех групп проводились комплексное офтальмологическое обследование и забор жидкости ПКГ для проведения протеомного исследования.
    Офтальмологическое обследование включало визометрию, периметрию, тонометрию, гониоскопию, биомикроскопию, прямую и обратную офтальмоскопию, оптическую когерентную томографию, ультразвуковое В-сканирование, пахиметрию, определение критической частоты слияния мельканий. 
    Забор жидкости ПКГ проводился во время первого этапа операции экстракции катаракты в филиале № 1 ГКБ им. С.П. Боткина «Офтальмологический стационар». Жидкость ПКГ исследовалась при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометрией. ВЭЖХ проводили с помощью прибора Agilent 1100 Series (Agilent Technologies, США). Тандемный масс-спектрометрический анализ проводили с помощью прибора Orbitrap Q Exactive (Thermo Scientific, США). Лабораторные исследования проводились на базе ФГБНУ «НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича» (ИБМХ).
    В исследование были включены 29 образцов жидкости ПКГ. Каждый образец исследовался с помощью ВЭЖХ  в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометрией в 3 технических повторах. Биоинформатический анализ полученных спектров проводился с использованием программы MaxQuant версии 1.5.2.8. Полученный список белков имел уровень ложноположительных результатов (FDR)=1% как для белковых, так и для пептидных идентификаций, что было получено путем сопоставления результатов с инвертированной базой данных. 
    Анализ аннотации белков жидкости ПКГ проводился с помощью Gene Ontology (GO). GO – это важный биоинформационный проект, посвященный созданию унифицированной терминологии для аннотации генов и генных продуктов всех биологических видов. Целями проекта являются поддержание и пополнение определенного списка генов и их продуктов, составление аннотаций генов и продуктов, а также разработка инструментов доступа к базе данных проекта. GO является частью более крупного проекта Open Biomedical Ontologies [35–37].
    Для определения уровня значимости обогащения использовали расчет значений p-value по формуле гипергеометрического распределения или мультивариантного гипергеометрического распределения, которое в теории вероятностей моделирует количество удачных выборок без возвращения из конечной совокупности. Наиболее значимыми считали биологические процессы с наименьшим значением p-value. Например, уровень значимости обогащения p=8,77×10-44 свидетельствует о высокой достоверности полученного результата.

    Результаты

    В работе найдены 263 белковые группы, характеризующие протеом жидкости ПКГ. Основная часть выделенных нами белковых групп отвечает за функцию связывания биологических молекул и тем самым осуществляет регуляцию клеточного ответа на различные сигналы, что важно для координации всех биохимических процессов, происходящих в жидкости ПКГ. 
    Большая часть белков (148 из 263) была обнаружена во всех группах. В соответствии с классификацией GO, большинство выделенных белковых групп участвуют в регуляции протеолиза. К примеру, ингибитор эндопептидазы и регулятор пептидазы, выделенные в жидкости ПКГ, предотвращают развитие патологического протеолиза. По литературным данным, большинство белков, обнаруженных в жидкости ПКГ, также выделены в плазме крови и спинномозговой жидкости [4].
    Из выделенных нами белков жидкости ПКГ особого внимания заслуживает Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF, фактор пигментного эпителия, genename SERPIN F1), который относится к семейству серпинов – белков, ингибирующих пептидазы. Данный белок выявлен во всех исследуемых группах. По литературным данным, PEDF синтезируется в клетках пигментного эпителия сетчатки [38], защищает нейрональные клетки от апоптоза и является природным ингибитором ангиогенеза [39].
    Особый интерес представляют 26 белков, выделенных только в группе пациентов с катарактой. Среди них α-кристаллин (идентификатор Gene Name CRYAA), витамин K-зависимый белок (PROS1), корнеодесмосин (CDSN), плакофилин-1 (PKP1), α-цепь тубулина (TUBA1B). По литературным данным, эти белки являются структурными составляющими вещества хрусталика и появляются в жидкости ПКГ при развитии катаракты [40, 41]. Авторы связывают их появление (особенно белков-кристаллинов) с биохимическими изменениями, происходящими при  развитии катаракты. Также авторы отмечают, что гены alpha-crystallin A (CRYAA), beta-crystallin A3 (CRYBA1) и beta-crystallin A4 (CRYBA4) относятся к генам, отвечающим за изменения в хрусталике,  соответственно, мутации в них вызывают катаракту.
    Из 16 белков, характеризующих катаракту с ПЭС, впервые выявленными являются 6 белков: флавин-редуктаза (BLVRB), белок S100-A1 (S100A1), глутатион-S-трансфераза-3 (GSTM3), α-1-цепь коллагена (COL18A1), рибонуклеаза-4 (RNASE4), десмин (DES). Для группы пациентов с глаукомой найдено 12 уникальных белков, 4 из них являются впервые выявленными: аполипопротеин С-III (APOC3), α-2-цепь коллагена (COL1A2), α-3-цепь коллагена (COL9A3), пролин-богатый белок-4 (PRR4).
    Из 4 белков, характеризующих глаукому с ПЭС, 2 являются впервые выявленными: F-бокс белок (NCCRP1) и НАД(Ф)Н-дегидрогеназа (NQO1).
    Семь белковых групп, найденных на пересечении множеств «катаракта + ПЭС» и «глаукома + ПЭС», позволяют выявить тенденции к возникновению различий белкового состава при ПЭС. Основные функции этих белков – участие в связывании различных биологических молекул и регуляция метаболических процессов в жидкости ПКГ. 
    Среди белков жидкости ПКГ по сравнению со всем протеомом человека чаще встречаются аннотированные как обладающие активностью в отношении ингибирования эндопептидаз (GO:0004866) (уровень значимости обогащения p=9,74×10-41), что свидетельствует о важности защиты жидкости ПКГ от протеолиза. Основной молекулярный процесс в протеоме жидкости ПКГ – каскад активации белков (GO:0072376) (уровень значимости обогащения p=8,77×10-44), т. к. клеточный сигналинг очень важен для координации биохимических процессов в клетках. Как и ожидалось, клеточная локализация белков жидкости ПКГ аннотирована как принадлежность к внеклеточному пространству (GO:0044421) (уровень значимости обогащения p=1,78×10-196). Это обусловлено тем, что белки внеклеточного матрикса играют важную роль в формировании структур глаза, а внутренняя поверхность эндотелиальных клеток граничит с ВВ, заполняющей ПКГ.
    Анализ аннотации белков, «конститутивно» представленных в жидкости ПКГ, по результатам нашей работы и ранее опубликованным данным показал, что чаще встречаются белки, аннотированные как обладающие активностью в отношении ингибирования эндопептидаз (GO:0004866) (уровень значимости обогащения p=1,73×10-34). Преобладающим молекулярным процессом  в протеоме жидкости ПКГ является негативная регуляция пептидазной активности (GO:0010466) (уровень значимости обогащения p=4,29×10-32), важная для защиты жидкости ПКГ от протеолиза. Так, например, протеолиз субъединиц коннексинов, образующих щелевые контакты между волокнами хрусталика, или волокон, в которые упакованы кристаллины, вызывает помутнение хрусталика [42]. Клеточная локализация аннотирована как принадлежность к внеклеточному пространству (GO:0005615) (уровень значимости обогащения p=8,99×10-84).

    Заключение

    Впервые в России были исследованы образцы жидкости ПКГ 29 пациентов с катарактой, глаукомой и ПЭС  методом хромато-масс-спектрометрии на приборе высокого разрешения.
    Полученные данные позволяют оценить различия в белковом составе внутриглазной жидкости у больных  представленных групп. В исследовании были идентифицированы группы белков, ранее не описанные в составе жидкости ПКГ. Также выявлены 4 уникальные группы белков, характерные для катаракты, ПЭС и глаукомы. Найдена тенденция к возникновению различий состава протеома жидкости ПКГ у больных с ПЭС и без него.
    Анализ объединенного протеома ВВ на предмет преобладания определенных структурно-функциональных групп белков с использованием категорий GО выявил, что основной функцией белков жидкости ПКГ является ингибирование эндопептидаз.
    Обнаруженные различия в белковом составе жидкости ПКГ свидетельствуют об изменении обмена веществ, что может являться одним из ключевых звеньев  патогенеза  ПЭС и глаукомы. 
    Проведение протеомных исследований глазных жидкостей является перспективным, т. к. дает возможность разработки методов диагностики и лечения заболеваний глаза.

Литература
1. Anderson N.L., Anderson N.G. Proteome and proteomics: new technologies, new concepts, and new words // Electrophorresis. 1998. Vol. 19 (11). P. 1853–1861.
2. Engholm-Keller K., Larsen M.R. Technologies and challenges in large-scale phosphoproteomic // Proteomics. 2013. Vol. 13 (6) P. 910–931.
3. James P. Protein identification in the post-genome era: the rapid rise of proteomics // Quarterly reviews of biophysics. 1997. Vol. 30 (4). P. 279–331.
4. Hu S., Loo J.A., Wong D.T. Human body fluid proteome analysis // Proteomics. 2006 Vol. 6. P. 6326–6353.
5. Власова М.А., Мошковский С.А., Сафарова М.Р. и др. Молекулярная диагностика рака яичника с использованием протеомных технологий // Биомедицинская химия. 2005. № 51 (4). С. 367–383 [Vlasova M.A., Moshkovskij S.A., Safarova M.R. et al. Proteomic technologies in molecular diagnosis of ovarian cancer // Biomedical chemistry. 2005. Vol. 51 (4). P. 367–383 (in Russian)].
6. Soltys S.G., Shi G., Tibshirani R. et al. The use of plasma SELDI-TOF MS proteomic patterns for detection of head and neck squamous cell cancers (HNSCC) // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2003. Vol. 57. P. 202.
7. Zhang Z., Bast R.C., Yu Y. et al. Three biomarkers identified from serum proteomic analysis for the detection of early stage ovarian cancer // Cancer Res. 2004. Vol. 64. P. 5882–5890.
8. Знаменская Л.Ф. Протеомные технологии в изучении патогенеза псориаза // Вестник дерматологии и венерологии. 2011. № 3. С. 27–33 [Znamenskaja L.F. Proteomic technologies in investigation of psoriasis pathogenesis // Herad of dermatology and venerology 2011. Vol. 3. P. 27–33 (in Russian)].
9. Гасанов М.З., Батюшин М.М., Терентьев В.П., Садовничая Н.А. Протеомный спектр мочи пациентов с хроническим гломерулонефритом // Клиническая нефрология. 2012. № 5. С. 28–32 [Gasanov M.Z., Batjushin M.M., Terent'ev V.P., Sadovnichaja N.A. Urine proteomic profiles in patients with chronic glomerulonephritis // Clin nephrol. 2012. Vol. 5. P. 28–32 (in Russian)].
10. Мошетова Л.К., Волков О.А. Современное представление о слезной жидкости, значение ее в диагностике // Клиническая офтальмология. РМЖ. 2004. № 5 (4). С. 138–141 [Moshetova L.K., Volkov O.A. Modern conception of lacrimal fluid and it’s role in diagnosis // RMJ. Clinical Ophthalmology. 2004. Vol. 5 (4). P. 138–141 (in Russian)].
11. Ethen C.M., Reilly C., Feng X. et al. The proteome of central and peripheral retina with progression of age-related macular degeneration // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2006. Vol. 47. P. 2280–2290.
12. Grus F.H., Podust V.N., Bruns K. et al. SELDI-TOF-MS Protein Chip array profiling of tears from patients with dry eye // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. Vol. 46. P. 863–876.
13. Ohashi Y., Ishida R., Kojima T. et al. Abnormal protein profiles in tears with dry eye syndrome // Am. J. Ophthalmol. 2003. Vol. 136. P. 291–299.
14. Civan M.M., Macknight A.D. The ins and outs of aqueous humour secretion // Exp Eye Res. 2004. Vol. 78. P. 625–631.
15. Jonsson M., Markstrom K., Behndig A. Slit-scan tomography evaluation of the anterior chamber and corneal con figurations at different ages // Act a Ophthalmol Scand. 2006. Vol. 84. P. 116–120.
16. Toris C.B., Yablonski M.E., Wang Y.L., Camras C.B. Aqueous humor dynamics in the aging human eye // Am. J. Ophthalmol. 1999. Vol. 127. P. 407–412.
17. Kim T.W., Kang J.W., Ahn J. et al. Proteomic analysis of the aqueous humor in age-related macular degeneration (AMD) patients // J Proteome Res. 2012. Vol. 11 (8). P. 4034–4043.
18. Schlotzer-Schrehardt U., Lommatzsch J., Kuchle M. et al. Matrix metalloproteinases and their inhibitors in aqueous humor of patients with pseudoexfoliation syndrome/glaucoma and primary open-angle glaucoma // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2003. Vol. 44. P. 1117–1125.
19. Воробьева И.В., Меркушенкова Д.А., Эстрин Л.Г. Роль фактора роста эндотелия сосудов в развитии диабетической ретинопатии и диабетического макулярного отека у больных сахарным диабетом второго типа // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2012. № 3. С. 48–55 [Vorob'eva I.V., Merkushenkova D.A., Jestrin L.G. The role of vascular endothelial growth factor in the development of diabetic retinopathy and diabetic macular edema in patients with type II diabetes // Questions of biological, medical and pharmaceutical chemistry. 2012. Vol. 3. P. 48–55 (in Russian)].
20. Соловьева Н.И. Основные металлопротеиназы соединительно-тканного матрикса // Биоорганическая химия. 1994. № 20 (2). С. 143–152 [Solov'eva N.I. Main metalloproteinases of connective tissue matrix // Bioorganic chemistry. 1994. Vol. 20 (2). P. 143–152 (in Russian)].
21. Hu D.N., Ritch R., Liebmann J. et al. Vascular endothelial growth factor is increased in aqueous humor of glaucomatous eyes // J. Glaucoma. 2002. Vol. 11. P. 406–410.
22. Vesaluoma M., Mertaniemi P., Mannonen S. et al. Cellular and plasma fibronectin in the aqueous humour of primary open-angle glaucoma, exfoliative glaucoma and cataract patients // Eye. 1998. Vol. 12. P. 886–890.
23. Бродская М.В., Бабижаев М.А., Ермолин Г.А. Об участии фибронектина в механизмах дистрофических изменений дренажной системы глаз при открытоугольной глаукоме // Вестник офтальмологии. 1988. № 104 (6). С. 10–13 [Brodskaja M.V., Babizhaev M.A., Ermolin G.A. Fibronectinin in development of degenerative changes of eye drainage system in patients with open-angle glaucoma // Herald of Ophthalmologу. 1988. Vol. 104 (6). P. 10–13 (in Russian)].
24. Kim K.S., Lee B.H., Kim I.S. Measurement of fibronectin concentrations in human aqueous humor // Korean J Ophthalmol. 1992. Vol. 6. P. 1–5.
25. Kuchle M., Ho T.S., Nguyen N.X. et al. Protein quantification and electrophoresis in aqueous humor of pseudoexfoliation eyes // Invest Ophthalmol Vis Sci. 1994. Vol. 35. P. 748–752.
26. Knepper P.A., Mayanil C.S., Goossens W. et al. Aqueous humor in primary open-angle glaucoma contains an increased level of CD44S // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2002. Vol. 43. P. 133–139.
27. Entwistle J., Hall C.L., Turley E.A. HA receptors: regulators of signaling to the cytoskeleton // J Cell Biochem. 1996. Vol. 61. P. 569–577.
28. Sherman L., Sleeman J., Dall P. et al. The CD44 proteins in embryonic development and in cancer // Curr Top Microbiol Immunol. 1996. Vol. 213 (1). P. 249–269.
29. Kaya G., Rodriguez I., Jorcano J.L. et al. Selective suppression of CD44 in keratinocytes of mice bearing an antisense CD44 transgene driven by a tissue-specifi c promoter disrupts hyaluronate metabolism in the skin and impairs keratinocyte proliferation // Genes Dev. 1997. Vol. 11. P. 996–1007.
30. Chaitin M.H., Wortham H.S., Brun-Zinkernagel A.M. Immunocytochemical localization of CD44 in the mouse retina // Exp Eye Res. 1994. Vol. 58. P. 359–365.
31. Knepper P.A., Goossens W., Mayanil C.S. CD44H localization in primary open-angle glaucoma // Invest Ophthalmol Vis Sci. 1998. Vol. 39. P. 673–680.
32. Knepper P.A., Miller A.M., Choi J. et al. Hypophosphorylation of aqueous humor sCD44 and primary open-angle glaucoma // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2005. Vol. 46. P. 2829–2837.
33. Kuchtey J., Rezaei K.A., Jaru-Ampornpan P. et al. Multiplex cytokine analysis reveals elevated concentration of interleukin-8 in glaucomatous aqueous humor // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010. Vol. 51. P. 6441–6447.
34. Sawada H., Fukuchi T., Tanaka T., Abe H. Tumor necrosis factor alpha concentrations in the aqueous humor of patients with glaucoma // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010. Vol. 51. P. 903–906.
35. Gene Ontology Database. Gene Ontology Consortium.
36. Smith B., Ashburner M., Rosse C. et al. The OBO Foundry: coordinated evolution of ontologies to support biomedical data integration // Nat Biotechnol. 2007. Vol. 25 (11). P. 1251–1255.
37. Blake J.A., Dolan M., Drabkin H. et al. Gene ontology annotations and resources // Nucleic Acids Res. 2013. Vol. 41.
38. Tombran-Tink J., Shivaram S.M., Chader G.J. et al. Expression, secretion, and age-related downregulation of pigment epithelium-derived factor, a serpin with neurotrophic activity // J. Neurosci. 1995. Vol. 15. P. 4992–5003.
39. Bouck N. PEDF: anti-angiogenic guardian of ocular function // Trends Mol Med. 2002. Vol. 8. P. 330–334.
40. Horwitz J. Alpha-crystallin // Exp Eye Res. 2003. Vol. 76. P. 145–153.
41. Yi J., Yun J., Li Z.K. et al. Epidemiology and molecular genetics of congenital cataracts // Int J Ophthalmol. 2011. Vol. 4. P. 422–32.
42. Nielsen P.A., Baruch A., Giepmans B.N., Kumar N.M. Characterization of the association of connexins and ZO-1 in the lens // Cell Commun Adhes. 2001. Vol. 8 (4–6). P. 213–217.

Только для зарегистрированных пользователей

зарегистрироваться

Поделитесь статьей в социальных сетях

Порекомендуйте статью вашим коллегам

Предыдущая статья
Следующая статья

Авторизируйтесь или зарегистрируйтесь на сайте для того чтобы оставить комментарий.

зарегистрироваться авторизоваться
Наши партнеры
Boehringer
Jonson&Jonson
Verteks
Valeant
Teva
Takeda
Soteks
Shtada
Servier
Sanofi
Sandoz
Pharmstandart
Pfizer
 OTC Pharm
Lilly
KRKA
Ipsen
Gerofarm
Egis
Dr. Reddis
Зарегистрируйтесь сейчас и получите доступ к полезным сервисам:
  • Загрузка полнотекстовых версий журналов (PDF)
  • Актуальные новости медицины
  • Список избранных статей по Вашей специальности
  • Анонсы конференций и многое другое

С нами уже 50 000 врачей из различных областей.
Присоединяйтесь!
Если Вы врач, ответьте на вопрос:
Дисфагия это:
Нажимая зарегистрироваться я даю согласие на обработку моих персональных данных
Если Вы уже зарегистрированы на сайте, введите свои данные:
Войти
Забыли пароль?
Забыли пароль?