Оценка микробиоты яичка у табакокурящих пациентов с необструктивной азооспермией

лет

предоставляем актуальную медицинскую информацию от ведущих специалистов, помогая врачам в ежедневной работе

Присоединяйтесь!

Уведомления

Личный
кабинет

лет

Присоединяйтесь!

лет

Присоединяйтесь!

Оценка микробиоты яичка у табакокурящих пациентов с необструктивной азооспермией

Урология

158

29 мая 2026

Российский университет дружбы народов, Москва

НПЦ репродуктивной и регенеративной медицины, Москва, Российская Федерация

КГМА — филиал ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, Казань, Россия

Введение: курение табака признано независимым фактором риска ухудшения параметров спермограммы, включая снижение концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов. В настоящее время влияние табакокурения на микробиоту яичка остается недостаточно изученным.

Цель исследования: оценить состав микробиоты яичка у табакокурящих пациентов с необструктивной азооспермией (НОА).

Материал и методы: в исследование включены мужчины с НОА (n=72). Все пациенты разделены на 2 группы: 1-я — курящие (n=33), 2-я — некурящие (n=39). Всем пациентам по показаниям в рамках программы вспомогательных репродуктивных технологий выполнена биопсия яичка по методике Micro-TESE (Microsurgical Testicular Sperm Extraction). Полученные тестикулярные биоптаты исследованы на состав микробиоты методом высокопроизводительного секвенирования нового поколения ампликонов гена 16S рРНК.

Результаты исследования: курение у пациентов с НОА способствует развитию дисбиоза в яичках, основными проявлениями которого являются двукратное увеличение относительной численности представителей семейства Enterobacteriaceae, значительный рост общего микробного разнообразия (α-разнообразия), увеличение видов условно-патогенных бактерий, нетипичных для нормальной среды яичка.

Заключение: микробиота яичка у табакокурящих пациентов с НОА становится более разнообразной, но происходит это за счет увеличения доли условно-патогенных микроорганизмов или несвойственных для данного органа бактерий, что приводит к ее выраженному дисбиозу.

Ключевые слова: микробиом, микробиота яичка, табакокурение, микробное разнообразие, условно-патогенная микрофлора, необструктивная азооспермия, мужское бесплодие, инфертильность, нарушение сперматогенеза.

Assessment of testicular microbiota in tobacco-smoking patients with non-obstructive azoospermia

M.V. Faniev¹, Z.A. Kadyrov¹, N.G. Kul'chenko¹, I.V. Vinogradov², Ya.V. Prokopiev³

¹ RUDN University, Moscow, Russian Federation

²Scientific Practical Center of Reproductive and Regenerative Medicine, Moscow, Russian Federation

³ Kazan State Medical Academy — Branch of the Russian Medical Academy of Continuous Professional Education, Kazan, Russian Federation

Background: tobacco smoking is recognized as an independent risk factor for deterioration of spermogram parameters including decreased concentration, motility, and morphology of sperm. Actually, impact of tobacco smoking on testicular microbiota is still underinvestigated.

Aim: to evaluate composition of the testicular microbiota in tobacco-smoking patients with non-obstructive azoospermia (NOA).

Materials and Methods: men with NOA (n=72) were enrolled in the study. All patients were divided into 2 groups. In particular, smokers were randomized in the Group 1 (n=33), and non-smokers represented the Group 2 (n=39). According to the indications, all the subjects underwent testicular biopsy by a Micro-TESE (Microsurgical Testicular Sperm Extraction) method in the frame of an assisted reproductive technology program. In the testicular biopsy samples, mcrobiota composition was tested by high-throughput sequencing of a new generation of 16S rRNA gene amplicons.

Results: in patients with NOA, smoking contributes to testicular dysbiosis whose main manifestations are a two-fold increase in abundance of Enterobacteriaceae families, a significant increase in total microbial diversity (α-diversity), and increased number of species of opportunistic bacteria which are not common for normal testicular environment.

Conclusion: although testicular microbiota in tobacco-smoking patients with NOA is becoming more diverse, this resulted from increased proportion of opportunistic pathogens or bacteria unusual for this organ; in turn, this leads to pronounced dysbiosis of the microbiota.

Keywords: microbiome, testicular microbiota, tobacco smoking, microbial diversity, opportunistic microflora, non-obstructive azoospermia, male infertility, infertility, impaired spermatogenesis.

For citation: Faniev M.V., Kadyrov Z.A., Kul'chenko N.G., Vinogradov I.V., Prokopiev Ya.V. Assessment of testicular microbiota in tobacco-smoking patients with non-obstructive azoospermia. Russian Medical Inquiry. 2026;10(4):209–213 (in Russ.). DOI: 10.32364/2587-6821-2026-10-4-6

Для цитирования: Фаниев М.В., Кадыров З.А., Кульченко Н.Г., Виноградов И.В., Прокопьев Я.В. Оценка микробиоты яичка у табакокурящих пациентов с необструктивной азооспермией. РМЖ. Медицинское обозрение. 2026;10(4):209-213. DOI: 10.32364/2587-6821-2026-10-4-6.

Введение

Бесплодие затрагивает каждую 6-ю супружескую пару, и в половине случаев причиной является мужской фактор бесплодия [1–3]. Необструктивная азооспермия (НОА) — наиболее тяжелая форма мужского фактора бесплодия, характеризующаяся отсутствием сперматозоидов в эякуляте вследствие нарушения сперматогенеза в извитых семенных канальцах [4]. Несмотря на значительный прогресс в области вспомогательных репродуктивных технологий, успех методов экстракорпорального оплодотворения и интрацитоплазматической инъекции сперматозоида напрямую зависит от возможности получения жизнеспособных гамет при проведении Micro-TESE (Microsurgical Testicular Sperm Extraction — микрохирургический забор ткани яичка) [5]. В связи с этим первостепенное значение приобретает выявление и коррекция факторов риска развития НОА [6]. Среди таких факторов, приводящих к НОА, наряду с эндокринными нарушениями и генетическими патологиями [7] все большее внимание исследователей привлекают образ жизни пациента и влияние на здоровье его привычек, в частности курения [8, 9]. Известно, что среди 37% семейных пар, обращающихся за медицинской помощью в центры репродукции, отмечается зависимость от табакокурения [10].

Актуальность данной проблемы обусловлена высокой распространенностью курения среди мужчин репродуктивного возраста. Нарушение сперматогенеза на фоне табакокурения происходит по причине различных факторов: развития оксидативного стресса, прямого токсического действия на клетки Лейдига и Сертоли, нарушения микроциркуляции яичка и т. д. [11, 12]. В свою очередь, в поиске новых патогенетических механизмов развития НОА все большее внимание привлекает роль микробиоты — сложного сообщества микроорганизмов, колонизирующих различные биотопы человека [13, 14]. Влияние курения на состав микробиоты респираторного тракта и толстой кишки хорошо известно. Однако микробиота мужского репродуктивного тракта, в частности микробный состав ткани яичка и его потенциальная связь с НОА у курящих мужчин, изучена мало.

Цель исследования: оценить состав микробиоты яичка у табакокурящих пациентов с НОА.

Материал и методы

В проспективное когортное лонгитюдное исследование (выписка из протокола № 24 заседания комитета по этике МИ Российского университета дружбы народов от 18.01.2024) с параллельными группами включены мужчины в возрасте от 23 до 56 лет (n=72), подписавшие добровольное информированное согласие, у которых по данным спермограммы и результатов клинического исследования установлен диагноз НОА. Критериями невключения в исследование были обструктивная азооспермия, острые инфекции нижних мочевыводящих путей, онкологические заболевания, варикоцеле, лечение антимикробными препаратами по поводу воспалительных заболеваний органов репродуктивного тракта менее 3 мес. назад, наличие патологических изменений в общем анализе секрета простаты и бактериологических посевах эякулята.

Все пациенты разделены на 2 группы в зависимости от наличия вредной привычки — злоупотребления табачными изделиями, по данным анамнеза, в количестве не более 1 пачки в день: 1-я группа — курящие (n=33), 2-я — некурящие (n=39).

Всем пациентам по показаниям в рамках программы ВРТ выполнена биопсия яичка по методике Micro-TESE. Полученные тестикулярные биоптаты исследованы на состав микробиоты. Для этого применен метод высокопроизводительного секвенирования нового поколения (Next-Generation Sequencing, NGS) ампликонов гена 16S рРНК по запатентованной методике [15]. Обработку данных проводили в программе QIIME (Quantitative Insights into Microbial Ecology). На этапе первичной обработки использовали версию 1.9.1, которая обеспечивала фильтрацию и кластеризацию последовательностей в операционные таксономические единицы. Для повышения точности таксономической классификации был выполнен переход на QIIME 2 с базой данных GreenGenes. Совместное применение этих программ позволило получить точные и воспроизводимые результаты исследования.

Статистический анализ данных выполнен с применением специализированного программного обеспечения Statistica (версия 10.0, StatSoft Inc., США). Первичный анализ количественных показателей проводили с расчетом медианы (Me) и 1-го и 3-го квартилей [Q1; Q3] для описания основной тенденции и определения разброса данных. Для оценки статистической значимости различий между независимыми группами использовали непараметрические методы как наиболее корректные для данных, не соответствующих нормальному распределению, и/или малых выборок. Для попарного сравнения двух групп, в том числе при получении значимого результата для критерия Краскела — Уоллиса, использовали U-критерий Манна — Уитни. Результаты признавали статистически значимыми при p<0,05.

Результаты исследования

Возраст пациентов с НОА в 1-й группе значимо выше, чем во 2-й, — 42 года и 35 лет соответственно (p<0,05). Возможно, этот факт связан с тем, что среди людей старшего поколения распространенность табакокурения изначально выше из-за отсутствия широкой пропаганды здорового образа жизни два десятилетия назад.

В микробиоте ткани яичка при НОА наблюдается относительная представленность в основном типов Proteobacteria, Actinobacteria, Bacteroidetes, Bacillota (ранее — Firmicutes). На рисунке 1 показаны семейства бактерий, относительная представленность которых в среднем превышает 1,8%.

У некурящих пациентов в микробиоте яичка отмечалось выраженное доминирование 3 семейств (Enterobacteriaceae, Burkholderiaceae и Lactobacillaceae), у курящих состав микробиоты радикально менялся: на фоне явного преобладания относительной представленности семейства Enterobacteriaceae исчезло доминирование других бактериальных семейств. Состав микробиоты у мужчин этой группы был более разнообразным и равномерным, при этом заметно увеличилась представленность множества других бактериальных семейств, таких как Peptoniphilaceae, Mycobacteriaceae, Staphylococcaceae (см. рис. 1). Таким образом, у пациентов обеих групп исследования значимую и высокую представленность в ткани яичка имело только семейство Enterobacteriaceae (род Escherichia). При этом в группе некурящих инфертильных мужчин относительная представленность вида Escherichia coli составила 11%, а курящих — 21% (по тесту Краскела — Уоллиса: p<0,05). У остальных бактериальных семейств относительная представленность в обеих группах наблюдения была в среднем <0,3% от всего микробного сообщества.

Для количественной оценки α-разнообразия использовали индекс Шеннона, который рассчитывали с помощью программы QIIME2. Так, индекс α-разнообразия микробиоты ткани яичка у некурящих инфертильных мужчин был ниже по сравнению с курящими (p>0,05) (рис. 2). У некурящих пациентов зафиксировано невыраженное разнообразие микробиоты, что может быть связано с доминированием 1–2 комменсальных видов бактерий или с очень низким уровнем бактериальной колонизации ткани яичка. Более высокое α-разнообразие микробиоты ткани яичка у курящих инфертильных мужчин говорит об изменении локальной иммунной среды, что потенциально может способствовать хроническому воспалению и нарушению сперматогенеза.

Рис. 1. Доминирующие семейства бактерий в микробиоте яичка у пациентов 1-й и 2-й групп Fig. 1. Predominant bacterial families in the testicular microbiota in the Groups 1 and 2

Рис. 2. Показатели α-разнообразия микробиоты ткани яичка у пациентов 1-й и 2-й групп Fig. 2. Indicators of α-diversity of testicular microbiota in the Groups 1 and 2

Обсуждение

Ежедневно миллионы мужчин добровольно подвергают себя воздействию нескольких тысяч токсичных соединений, содержащихся в сигаретном дыме, не задумываясь об их прямом влиянии на репродуктивную функцию. Известно, что компоненты табачного дыма — это более 7 тыс. химических соединений, среди которых никотин, продукты горения, тяжелые металлы (кадмий, свинец) и свободные радикалы [16], оказывающие повреждающее действие на сперматогенез.

Основной патогенетический фактор развития патоспермии у курильщиков — появление и прогрессия оксидативного стресса. Табачный дым содержит очень большое количество прооксидантов (свободных радикалов). В то же время у курящих мужчин наблюдается снижение уровня антиоксидантов (витаминов C, E, глутатиона) в семенной плазме. Этот дисбаланс приводит к избыточному образованию активных форм кислорода, высокие уровни которого способствуют разрушению липидных мембран сперматозоидов, повреждению митохондрий и, что самое опасное, вызывают фрагментацию ядерной ДНК [17].

Такие компоненты дыма, как кадмий, никотин, тропны к яичкам. Накапливаясь в них, кадмий напрямую угнетает синтез тестостерона клетками Лейдига и повреждает клетки Сертоли [10, 18]. Это приводит к гормональному дисбалансу и разрушению оптимальной среды для развития сперматозоидов. Кроме того, никотин вызывает спазм сосудов и ухудшает микроциркуляцию крови. В яичках это приводит к хронической гипоксии, что дополнительно угнетает клеточный метаболизм и процессы деления половых клеток.

Так, в экспериментальном исследовании L. Zhong et al. [19] отмечено, что воздействие сигаретного дыма на протяжении 12 нед. привело к значительному уменьшению размера и массы семенников у мышей (p<0,05), а общая подвижность сперматозоидов у них снизилась на 48,08% по сравнению с результатами контрольной группы (p<0,01). В семенниках животных, которые дышали сигаретным дымом, значимо увеличилось относительное обилие бактерий типов Firmicutes (или Bacillota согласно текущему таксономическому названию) и Actinobacteria (p<0,05) и уменьшился этот же показатель Bacteroidetes и Proteobacteria.

Наше исследование показало, что у пациентов с НОА курение ассоциируется с глубоким дисбиозом (нарушением баланса) микробиоты яичка — это проявляется двукратным преобладанием семейства Enterobacteriaceae и значительным увеличением микробного разнообразия за счет роста условно-патогенных или несвойственных для этого органа бактерий. Такое изменение микробного сообщества в яичке у инфертильных мужчин может иметь негативные последствия для местного иммунитета и, возможно, вызывать необратимое нарушение сперматогенеза.

Заключение

У пациентов с НОА курение ассоциировано со значительным изменением микробиоты яичка, оно приводит к ее выраженному дисбиозу: увеличивает долю бактерий семейства Enterobacteriaceae в 2 раза, повышает общее микробное разнообразие в интерстиции и способствует колонизации гонады условно-патогенной и чужеродной микрофлорой.

Результаты проведенной работы расширяют представления о патогенезе мужского бесплодия. Изучение тестикулярной микробиоты позволяет рассматривать проблему НОА не только в традиционной плоскости гормонально-генетических нарушений, но и с точки зрения микробной экологии репродуктивных органов, особенно на фоне злоупотребления курением.

Сведения об авторах:

Фаниев Михаил Владимирович — к.м.н., доцент кафедры эндоскопической урологии ФПКМР МИ Российского университета дружбы народов; 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6; ORCID iD 0000-0002-7323-3126

Кадыров Зиератшо Абдуллоевич — д.м.н., профессор, заведующий кафедрой эндоскопической урологии и ультразвуковой диагностики ФНМО МИ Российского университета дружбы народов; 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6; ORCID iD 0000-0002-1108-8138

Кульченко Нина Геннадьевна — к.м.н., уролог, врач ультразвуковой диагностики, ведущий научный сотрудник Научно-образовательного ресурсного центра инновационных технологий иммунофенотипирования, цифрового пространственного профилирования и ультраструктурного анализа (молекулярной морфологии) Российского университета дружбы народов; 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6; ORCID iD 0000-0002-4468-3670

Виноградов Игорь Владимирович — д.м.н., научный руководитель НПЦ репродуктивной и регенеративной медицины; 125284, Россия, г. Москва, ул. Беговая, д. 7; ORCID iD 0000-0001-7469-3952

Прокопьев Ярослав Валерьевич — к.м.н., доцент кафедры урологии и нефрологии КГМА — филиала ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России; 420012, Россия, г. Казань, ул. Муштари, д. 11; ORCID iD 0000-0002-4345-127X

Контактная информация: Прокопьев Ярослав Валерьевич, e-mail: yar80@mail.ru

Прозрачность финансовой деятельности: никто из авторов не имеет финансовой заинтересованности в представленных материалах или методах.

Конфликт интересов отсутствует.

Статья поступила 01.02.2026.

Поступила после рецензирования 25.02.2026.

Принята в печать 23.03.2026.

About the authors:

Mikhail V. Faniev — C. Sc. (Med.), Assistant Professor of the Department of Endoscopic Urology, Faculty of Advanced Training for Medical Practitioners, Medical Institute, RUDN University; 6, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117198, Russian Federation; ORCID iD 0000-0002-7323-3126

Zieratsho A. Kadyrov — Dr. Sc. (Med.), Professor, Head of the Department of Endoscopic Urology and Ultrasound Diagnosis, Faculty of Continuing Medical Education, Medical Institute, RUDN University; 6, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117198, Russian Federation; ORCID iD 0000-0002-1108-8138

Nina G. Kul'chenko — C. Sc. (Med.), Urologist, Ultrasound Doctor, Leading Scientific Officer at the Scientific and Educational Resource Center for Innovative Technologies of Immunophenotyping, Digital Spatial Profiling and Ultrastructural Analysis (Molecular Morphology), RUDN University; 6, Miklukho-Maklaya str., Moscow, 117198, Russian Federation; ORCID iD 0000-0002-4468-3670

Igor V. Vinogradov — Dr. Sc. (Med.), Academic Adviser of the Scientific Practical Center of Reproductive and Regenerative Medicine; 7, Begovaya str., Moscow, 125284, Russian Federation; ORCID iD 0000-0001-7469-3952

Yaroslav V. Prokopiev — C. Sc. (Med.), Assistant Professor of the Department of Urology and Nephrology, Kazan State Medical Academy — Branch of the Russian Medical Academy of Continuous Professional Education; 11, Mushtari str., Kazan, 420012, Russian Federation; ORCID iD 0000-0002-4345-127X

Contact information: Yaroslav V. Prokopiev, e-mail: yar80@mail.ru

Financial Disclosure: no authors have a financial or property interest in any material or method mentioned.

There is no conflict of interest.

Received 01.02.2026.

Revised 25.02.2026.

Accepted 23.03.2026.

1. Tharakan T., Luo R., Jayasena C.N., Minhas S. Non-obstructive azoospermia: current and future perspectives. Fac Rev. 2021;10:7. DOI: 10.12703/r/10-7
2. Проскурнина Е.В., Мельников Н.А., Черных В.Б. и др. Функциональная активность лейкоцитов в семенной жидкости при патоспермии. Урология. 2019;(6):78–82. DOI: 10.18565/urology.2019.6.78-82Proskurnina E.V., Melnikov N.A., Chernykh V.B. et al. Functional activity of leukocytes in seminal fluid with pathospermia. Urologiia. 2019;(6):78–82. DOI: 10.18565/urology.2019.6.78-82
3. Dhikhirullahi O., Zhang Z. Male infertility. Syst Biol Reprod Med. 2025;71(1):416–438. DOI: 10.1080/19396368.2025.2548492
4. Punjani N., Kang C., Lamb D.J., Schlegel P.N. Current updates and future perspectives in the evaluation of azoospermia: A systematic review. Arab J Urol. 2021;19(3):206–214. DOI: 10.1080/2090598x.2021.1954415
5. Кульченко Н.Г., Фаниев М.В., Атякшин Д.А. и др. Патент 2814377 РФ. Способ определения необходимости выполнения ВРТ с дона-цией сперматозоидов при идиопатическом мужском бесплодии с необструктивной азооспермией. (Электронный ресурс.) URL: https://patentimages.storage.googleapis.com/f9/e2/7e/007b5d028a605c/RU2830702C1.pdf (дата обращения: 01.04.2025).Kulchenko N.G., Faniev M.V., Atiakshin D.A. et al. Patent 2814377 of the Russian Federation. Method for determining the need for assisted reproductive technologies (ART) with sperm donation in idiopathic male infertility with non-obstructive azoospermia. (Electronic resource.) URL: https://patentimages.storage.googleapis.com/fd/6a/a4/04eff2a97e2ec1/RU2810467C1.pdf (access date: 01.04.2025) (in Russ.).
6. Atiakshin D., Kulchenko N., Kostin A. et al. Cyto- and histopographic assessment of CPA3-positive testicular mast cells in obstructive and non-obstructive azoospermia. Cells. 2024;13(10):833. DOI: 10.3390/cells13100833
7. Parvin A., Shadravan M.M., Sadeghpour S. et al. Personalized biomarkers in male infertility. Clin Chim Acta. 2026;579:120623. DOI: 10.1016/j.cca.2025.120623
8. Zhang X., Zhu Z., Shen C., Tang G. Causal relationship between smoking and male infertility: A two-sample mendelian randomization study. Asian J Surg. 2024:S1015-9584(24)02600-9. DOI: 10.1016/j.asjsur.2024.10.266
9. Basic M., Mitic D., Krstic M., Cvetkovic J. Tobacco and alcohol as factors for male infertility-a public health approach. J Public Health (Oxf). 2023;45(2):e241–e249. DOI: 10.1093/pubmed/fdac042
10. Barbagallo F., Assenza M.R., Torrisi F. et al. The smoky impact of nicotinic acetylcholine receptors on testicular function. J Clin Med. 2024;13(17):5097. DOI: 10.3390/jcm13175097
11. Вознесенская Н.В., Степанова Л.А., Закураева К.A., Гафурова Д.Р. Курение как фактор риска мужского бесплодия. Международный журнал перспективных исследований в области медицины и биомедицинских наук. 2019;(1):22–30.Voznesenskaya N.V., Stepanova L.A., Zakuraeva K.A., Gafurova D.R. Smoking as a risk factor for male infertility. International Journal of Advanced Studies in Medicine and Biomedical Sciences. 2019;(1):22–30 (in Russ.).
12. Takalani N.B., Monageng E.M., Mohlala K. et al. Role of oxidative stress in male infertility. Reprod Fertil. 2023;4(3):e230024. DOI: 10.1530/RAF-23-0024
13. Кульченко Н.Г., Фаниев М.В., Кадыров З.А. и др. Тучные клетки в сочетании с обеднением микробиома яичка как фактор патогенеза необструктивного мужского бесплодия. Экспериментальная и клиническая урология. 2024;17(3):94–99. DOI: 10.29188/2222-8543-2024-17-3-94-99Kulchenko N.G., Faniev M.V., Kadyrov Z.A. et al. Mast cells in combination with depletion of testicular microbiome as a factor in the pathogenesis of non-obstructive male infertility. Experimental and Clinical Urology. 2024;17(2):94–99 (in Russ.). DOI: 10.29188/2222-8543-2024-17-3-94-99
14. Martinot E., Thirouard L., Holota H. et al. Intestinal microbiota defines the GUT-TESTIS axis. Gut. 2022;71(4):844–845. DOI: 10.1136/gutjnl-2021-324690
15. Фаниев М.В., Кадыров З.А., Гудков Г.В. и др. Патент 2810467 РФ. Способ малоинвазивного выделения бактериальной ДНК из биоптата тестикулярной ткани у инфертильных мужчин. (Электронный ресурс.) URL: https://patentimages.storage.googleapis.com/fd/6a/a4/04eff2a97e2ec1/RU2810467C1.pdf (дата обращения: 01.04.2025).Faniev M.V., Kadyrov Z.A., Gudkov G.V. et al. Patent 2810467 of the Russian Federation. A method for minimally invasive isolation of bacterial DNA from a testicular tissue biopsy in infertile men). (Electronic resource.) URL: https://patentimages.storage.googleapis.com/fd/6a/a4/04eff2a97e2ec1/RU2810467C1.pdf (access date: 01.04.2025) (in Russ.).
16. Klupinski T.P., Strozier E.D., Friedenberg D.A. et al. Identification of new and distinctive exposures from little cigars. Chem Res Toxicol. 2016;29(2):162–168. DOI: 10.1021/acs.chemrestox.5b00371
17. Aitken R.J., Bakos H.W. Should we be measuring DNA damage in human spermatozoa? New light on an old question. Hum Reprod. 2021;36(5):1175–1185. DOI: 10.1093/humrep/deab004
18. Saygın H., Korgalı E., Koç T., Doğan K. The effect of smoking and electronic cigarettes on rat testicles. Rev Int Androl. 2023;21(3):100365. DOI: 10.1016/j.androl.2023.100365
19. Zhong L., Qin L., Ding X. et al. The regulatory effect of fermented black barley on the gut microbiota and metabolic dysbiosis in mice exposed to cigarette smoke. Food Res Int. 2022;157:111465. DOI: 10.1016/j.foodres.2022.111465